本發明提供了一種蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體反浮選分離純化生產工藝，具體生產工藝為：按重量百分比稱取牛肉膏0.2～0.4％，蛋白胨0.6～1.5％，氯化鈉0.3～0.6％，瓊脂1.3～2.5％，水95～98％，用NaOH調pH＝7.4～7.6，100～130℃滅菌20～40分鐘，倒入培養皿中，自然冷卻至室溫，液體凝固形成瓊脂固體培養基；在培養基表面上按“之”字形接種，之后在生化培養箱中26～36℃培養36～48小時，得到無菌水菌苔懸濁液，注入高效微泡浮選柱中浮選，離心液漿10～20min，得到伴孢晶體半成品；用生理鹽水和無菌純凈水洗滌伴孢晶體半成品，以7000～9000轉/分鐘的轉速離心，得到含水的伴孢晶體，經真空干燥得到伴孢晶體純品，于-20～-80℃環境中保存。該方法工藝簡單、易于操作、產品純度在99.99％以上、生產成本低、適合于工業化生產。

1.一種蘇云金芽孢桿菌伴孢晶體反浮選分離純化生產工藝，其特征在于：按重量
百分比稱取牛肉膏0.2～0.4％，蛋白胨0.6～1.5％，氯化鈉0.3～0.6％，瓊脂1.3～2.5％，
余量為水，用NaOH調pH＝7.4～7.6，100～130℃滅菌20～40分鐘，在潔凈工作臺中將
滅菌后的液體倒入已滅過菌的大培養皿中，自然冷卻至室溫，液體凝固形成瓊脂固體培
養基；用接種環沾取Bt菌種，在瓊脂固體培養基表面接種，之后在生化培養箱中26～
36℃培養36～48小時；用無菌純凈水將菌苔沖洗到容器中，得到無菌水菌苔懸濁液；
用超聲波細胞粉碎機處理菌苔懸濁液10～30分鐘后，將此菌苔懸濁液注入微泡浮選柱
中浮選；在此反浮選過程中，芽孢和營養體碎片進入泡沫層而脫離體系，伴孢晶體則留
在液漿中，之后以7000～9000轉/分鐘的轉速離心液漿10～20min，棄去上清液，得到
伴孢晶體半成品；洗滌伴孢晶體半成品，以7000～9000轉/分鐘的轉速離心，得到含水
的伴孢晶體，在-20～-80℃，0.1～1.0Pa真空度條件下干燥3～4小時，得到伴孢晶
體純品。
2.如權利要求1所述的生產工藝，其特征在于，在瓊脂固體培養基表面上按“之”
字形接種。
3.如權利要求1所述的生產工藝，其特征在于，所述的浮選是將菌苔懸濁液逐步
注入30～100L微泡浮選柱中，浮選的進氣量為2～8L/min，浮選10～30分鐘。
4.如權利要求1所述的生產工藝，其特征在于，所述的洗滌伴孢晶體半成品是用
0.5～1.5M?NaCl生理鹽水洗滌伴孢晶體半成品3～5次，每次10～15L，再用無菌純凈
水洗滌伴孢晶體半成品3～5次。
5.如權利要求1所述的生產工藝，其特征在于，得到的伴孢晶體純品于-20～-80℃
環境中保存。