本發(fā)明構(gòu)建了一種基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器及其應(yīng)用，屬于生物傳感技術(shù)領(lǐng)域。PB可以接收到來自生物陽極的電子轉(zhuǎn)化為普魯士白(prussian white,PW)，而PB的藍(lán)色也可以通過得到電子轉(zhuǎn)化為透明的PW。從藍(lán)色到無色的變化速度取決于副溶血性弧菌的濃度。這種顏色可以通過將其連接到生物陽極上而恢復(fù)到原來的PB狀態(tài)。當(dāng)目標(biāo)副溶血性弧菌存在時(shí)，EBFCs產(chǎn)生的開路電壓隨之降低，其振幅依賴于對目標(biāo)的適配體識別的副溶血性弧菌濃度。副溶血性弧菌由于空間位阻效應(yīng)阻止了燃料葡萄糖接近生物陽極上葡萄糖脫氫酶(GDH)活性位點(diǎn)，導(dǎo)致普魯士白的顏色減少。本發(fā)明實(shí)現(xiàn)對food pathogens簡單、方便、快速、靈敏、高效檢測。

1.一種利用基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法，所述基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器包括陽極、PB電極、陰極和電解液；所述陽極為MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極，所述陰極為BOD/CNTs/CP生物陰極，所述電解液為含1～3mM NAD⁺/NADH、3～6mM葡萄糖，pH 6.0的0.1M PB緩沖體系；所述MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極的制備方法包括如下步驟：對修飾有CNT/AuNPs的CP電極表面進(jìn)行循環(huán)伏安掃描聚合上硫堇，電極用含有GDH溶液和適配體SH-DNA的混合物涂覆，一次孵育，獲得aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP；二次水沖洗電極表面，向電極表面滴加MCH溶液，二次孵育，進(jìn)行封板，二次水沖洗電極表面，得到MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極；所述檢測食物中致病菌的方法包括如下步驟：步驟(1)：將MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極、PB電極、含1～3mM NAD⁺/NADH、3～6mM葡萄糖，pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池，測量電池的E₁^OCV，E₁^OCV為生物陽極與PB電極之間的開路電壓，記為E₁₀^OCV；將BOD/CNT/CP生物陰極、PW電極、含1～3mM NAD⁺/NADH、3～6mM葡萄糖pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池，測量電池的E₂^OCV，E₂^OCV為PW電極與生物陰極之間的開路電壓，記為E₂₀^OCV；步驟(2)：將MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極置于0.5～2mL不同濃度的致病菌，在37℃孵育60～120分鐘，得到pathogens/MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極，二次水沖洗電極表面；步驟(3)：pathogens/MCH/aptamer/GDH/PTH/CNT/AuNPs/CP生物陽極、PB電極、含1～3mM NAD⁺/NADH、3～6mM葡萄糖，pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池，測量電池的E₁^OCV，記為E_1n^OCV；將BOD/CNT/CP生物陰極、PW電極、含pH 6.0的0.1M PB緩沖體系組裝為電池，測量電池的E₂^OCV，記為E_2n^OCV，觀察PB電極的顏色變化。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法，其特征在于，所述GDH和適配體濃度分別為1～4mg mL^-1和400～700nM，混合物滴涂量為25～60μL。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法，其特征在于，所述對電極表面進(jìn)行循環(huán)伏安掃描聚合硫堇的掃速為30-70mv s^-1，所述硫堇溶于2.2mM乙酸溶液中，使硫堇濃度為1～3mM。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法，其特征在于，MCH溶液為20～50μL、1～3mM的MCH溶液。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法，其特征在于，所述一次孵育的條件為3～7℃孵育8～16h。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用基于EBFC的自供能細(xì)菌生物傳感器檢測食物中致病菌的方法，其特征在于，所述二次孵育的條件為室溫孵育0.5～2h。