1.一種玉米秸稈制備生物絮凝劑的方法,其特征在于,包括以下步驟:S1、原料制備:玉米秸稈自然風干后,通過粉碎機將風干的玉米秸稈粉碎、篩分,篩選出粒徑為35-40目的部分,放入真空干燥箱中,在溫度為100-105℃條件下干燥,將干燥后的原料置于干燥器中儲備備用;S2、水熱預處理:S2.1:取20-21g干燥后的原料加入至400-410mL的去離子水中,再加入催化劑FeCl31.0-1.1g和20-21ml濃度為6mg/mL的高溫滲透劑JFC-M溶液,混合后加入到反應釜中,并密封反應釜;S2.2:通過磁力攪拌器進行攪拌,將磁力攪拌器的轉速調至260-280r/min,開始加熱,當溫度為160-165℃時,恒溫保持20-25min,進行水熱預處理;S2.3:預處理反應結束后,通過布氏漏斗進行固液分離,固相物料待酶解;S3、酶解:稱8.0-8.2g固相物料,置于酶解瓶,依次加入40-50ml濃度為0.1 mol/L的HAc-NaAc緩沖液、0.2-0.4ml濃度為10mg /ml的鹽酸四環素溶液、3-5ml濃度為6mg/mL的Tween80溶液和2-4ml濃度為5mg/mL的JFC-S溶液,同時加入8-10FPU/g底物的纖維素酶和0.5-1.0CBU/g底物的纖維二糖酶,補加蒸餾水至液體總體積為100ml ,再加入玻璃球,蓋上瓶塞;混合均勻后,將酶解瓶放入搖床內進行酶解,溫度設為49-50℃、轉速180r/min、酶解時間72-75h,酶解液過濾,濾液用于制備生物絮凝劑;S4、制備絮凝劑發酵液:絮凝菌發酵培養基:取S3中濾液1000mL,加入KH2PO41-2g、K2HPO4 3-5g、NaCl 0.1-0.3g、尿素0.5-0.7g以及酵母膏0.2-0.3g,調節pH至7.0-7.5;混勻后分別量取250mL裝入四只三角瓶中,蓋上瓶塞,在110-120℃下滅菌25-30min;取滅菌好的上述培養基250mL,在無菌條件下接入絮凝劑產生菌,置于恒溫搖床上于30-31℃、145-150r/min下振蕩培養30-32h,即為絮凝劑發酵液;S5、絮凝活性成分提取及干燥:將制取的絮凝劑發酵液在轉速10000-12000r/min、溫度2-4℃下離心20min,使菌體和分泌物分離,收集上清液;將上清液通過旋轉蒸發儀真空濃縮至體積減少一半;濃縮后的上清液中加入2-3倍上清液體積、2-4℃預冷的無水乙醇,振蕩至出現白色絲狀絮體;將上述醇提液體在常溫、轉速4000-5000r/min條件下離心分離10-15min,用無水乙醇洗滌沉淀,收集沉淀;將所得沉淀溶于蒸餾水中,加入2-3倍體積、2-4℃預冷的無水乙醇,振蕩后于常溫、轉速4000-5000r/min條件下離心10-15min,收集沉淀,反復2次;將沉淀分別用丙酮、乙醚洗滌一次,于30-40℃真空干燥,即為生物絮凝劑產品。2.根據權利要求1所述的一種玉米秸稈制備生物絮凝劑的方法,其特征在于,步驟S3中,緩沖液的pH為4.8,其配制方法為:量取冰醋酸6mL,用蒸餾水定容至1000mL ,配制成0.1mol/L的HAc溶液;稱取8.2g無水醋酸鈉,溶解后定容至1000mL ,配成0.1 mol/L的NaAc溶液;HAc溶液和NaAc溶液按體積比4:6混合均勻即可。3.根據權利要求1所述的一種玉米秸稈制備生物絮凝劑的方法,其特征在于,步驟S3中,鹽酸四環素溶液的配制方法為:稱取0.1 g鹽酸四環素,蒸餾水定容至10mL ,搖勻,待用。4.根據權利要求1所述的一種玉米秸稈制備生物絮凝劑的方法,其特征在于,步驟S3中,Tween80溶液的配制方法為:稱取1.2g Tween80,溶于200ml水,搖勻,待用。5.根據權利要求1所述的一種玉米秸稈制備生物絮凝劑的方法,其特征在于,步驟S3中,JFC-S溶液的配制方法為:稱取1.0g滲透劑JFC-S,溶于200ml水,搖勻,待用。6.根據權利要求1所述的一種玉米秸稈制備生物絮凝劑的方法,其特征在于,步驟S2中,高溫滲透劑JFC-M溶液的配制方法為:稱取1.2g JFC-M,溶于200ml水,搖勻,待用。
展開