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一種維生素D合成抗原、其制備方法及應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-08
  • 技術成熟度:可以量產
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201210287219.5 
  • 技術(專利)名稱 一種維生素D合成抗原、其制備方法及應用 
  • 項目單位 北京博暉創新光電技術股份有限公司
  • 發明人 楊奇,崔建華 
  • 行業類別 醫藥制造-中成藥
  • 技術成熟度 可以量產
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 沈鈞才
  • 發布時間 2021-12-08  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供了一種維生素D合成抗原及其制備方法,所述維生素D合成抗原為維生素D與蛋白載體的偶聯物,所述維生素D為25-羥基維生素D3或1,25-二羥維生素D3,所述蛋白載體為牛血清白蛋白、卵清蛋白、血藍蛋白、人血清白蛋白中的一種或多種。本發明還提供所述維生素D合成抗原在維生素D免疫學檢測中的應用。本發明進一步提供維生素D檢測試劑盒,其集成了現有臨床維生素D檢測方法的優點,可適用于所有酶標儀、化學發光儀和時間分辨分析儀,檢測時間大大縮短,且靈敏度、準確度、精密度均可滿足檢測要求。采用本發明的通用性強的免疫吸附檢測試劑盒,可實現血清(或血漿)中維生素D的批量、快速檢測。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種維生素D合成抗原,其特征在于,其為維生素D與蛋白載
    體的偶聯物,所述維生素D為25-羥基維生素D3或1,25-二羥維生素D3,
    所述蛋白載體為牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白中的一種或
    多種;
    所述維生素D與蛋白載體的重量比為1:16~20;
    維生素D合成抗原的制備方法包括如下步驟:
    1)將蛋白載體溶于pH8.5的緩沖液中,得溶液A;
    2)將維生素D溶于乙醇、二甲基亞砜或吡啶中,得溶液B;
    3)分別向溶液A和B中加入活化劑,得到活化的蛋白載體和維生
    素D;
    4)以N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙
    基碳二亞胺鹽酸鹽或N,N'-二環已基碳二亞胺為偶聯劑,將上述活化
    的蛋白載體和維生素D進行偶聯;
    5)透析、干燥,即得維生素D合成抗原;
    其中,步驟3)中所述活化劑為含乙二胺和乙二胺二鹽酸鹽的磷
    酸氫二鈉溶液、4-二甲氨基吡啶-丙酮混合液、戊二醛或甲醛。
    2.制備權利要求1所述維生素D合成抗原的方法,其特征在于,
    包括步驟:
    1)將蛋白載體溶于pH8.5的緩沖液中,得溶液A;
    2)將維生素D溶于乙醇、二甲基亞砜或吡啶中,得溶液B;
    3)分別向溶液A和B中加入活化劑,得到活化的蛋白載體和維生
    素D;
    4)以N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙
    基碳二亞胺鹽酸鹽或N,N'-二環已基碳二亞胺為偶聯劑,將上述活化
    的蛋白載體和維生素D進行偶聯;
    5)透析、干燥,即得維生素D合成抗原;
    其中,步驟3)中所述活化劑為含乙二胺和乙二胺二鹽酸鹽的磷
    酸氫二鈉溶液、4-二甲氨基吡啶-丙酮混合液、戊二醛或甲醛。
    3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,步驟1)中所述的
    緩沖液為磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液或Tris緩沖液。
    4.權利要求1所述維生素D合成抗原在維生素D免疫學檢測中的
    應用。
    5.根據權利要求4所述的應用,其特征在于,其是將所述維生素
    D合成抗原與標記物結合作為競爭性抗原,通過與樣品中的維生素D
    競爭結合維生素D單克隆抗體,從而檢測樣品中的維生素D含量。
    6.根據權利要求5所述的應用,其特征在于,所述標記物為:
    a)辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶;
    b)吖啶酯類化合物;或
    c)螯合有Eu3+、Sm3+、Tb3+或Dy3+的二乙烯三胺五乙酸、2-[(4-
    氰基苯基)甲基]-1,4,7,10-四氮環十二烷-1,4,7,10-四乙酸或4,7-二氯磺
    基苯-1,10-菲羅啉-2,9-二羧酸。
    7.根據權利要求5所述的應用,其特征在于,所述維生素D單克
    隆抗體為Abcam公司的維生素D單抗產品。
    8.維生素D免疫學檢測試劑盒,其特征在于,其包括包被維生
    素D單克隆抗體的酶標板、權利要求1所述的維生素D合成抗原經標記
    物標記后得到的競爭性抗原;
    其中,所述維生素D單克隆抗體為Abcam公司的維生素D單抗產
    品;所述標記物為:a)辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶;b)魯米諾或
    吖啶酯類化合物;或c)螯合有Eu3+、Sm3+、Tb3+或Dy3+的二乙烯三胺
    五乙酸、2-[(4-氰基苯基)甲基]-1,4,7,10-四氮環十二烷-1,4,7,10-四乙酸
    或4,7-二氯磺基苯-1,10-菲羅啉-2,9-二羧酸。
    9.根據權利要求8所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包
    括洗滌液、維生素D標準品、底物顯色液、反應終止液中的一種或多
    種。
    展開

專利技術附圖

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