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肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒及其使用方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-12-08
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201010114243.X 
  • 技術(專利)名稱 肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒及其使用方法 
  • 項目單位 廣州華峰生物科技有限公司
  • 發明人 曹以誠,杜正平,陳洵,李志勇,高東微,田文武,馮雪梅,尹斌 
  • 行業類別 醫藥制造-化學藥品制劑
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 李俊輝
  • 發布時間 2021-12-08  
  • 01

    項目簡介

    本發明提供一種肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒,所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒包括以肺炎克雷伯氏菌的oppA基因為靶基因、基于環介導恒溫擴增技術設計的兩對引物:內引物FIP/BIP和外引物F3/B3。本發明的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒檢測效果更全面、漏檢率低。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒,其特征在于,所述的肺炎克雷伯氏菌
    檢測試劑盒包括以肺炎克雷伯氏菌的oppA基因為靶基因、基于環介導恒溫擴增
    技術設計的兩對引物:內引物FIP/BIP和外引物F3/B3,所述的兩對引物為
    外引物F3(1):
    TACGCCCCGGTCTGAC
    外引物B3(1):
    GCGCTTTCACCCCCAAC
    內引物FIP(1):
    GGCGAGACCAGTCGTTGCCATTTTCGACGGCACGGCCATT
    內引物BIP(1):
    AACAGCCTCCCCCTACGCGATTTTGTCCCTTTTGCCCGAGG

    外引物F3(2):
    TACGCCCCGGTCTGAC
    外引物B3(2):
    GCGCTTTCACCCCCAAC
    內引物FIP(2):
    GGCGAGACCAGTCGTTGCCACGACGGCACGGCCATT
    內引物BIP(2):
    AACAGCCTCCCCCTACGCGAGTCCCTTTTGCCCGAGG

    外引物F3(3):
    GCCATTACAGCGCAGGAT
    外引物B3(3):
    TGCAGCGTGGTGTCGT
    內引物FIP(3):
    GGTAGCTCGCGTAGGGGGATTTTCGTCTGGAGCTGGCAACG
    內引物BIP(3):
    CATATCGCCAACGCCCGCGTTTTGCGCTTTCACCCCCAAC

    外引物F3(4):
    GCCATTACAGCGCAGGAT
    外引物B3(4):
    TGCAGCGTGGTGTCGT
    內引物FIP(4):
    GGTAGCTCGCGTAGGGGGACGTCTGGAGCTGGCAACG
    內引物BIP(4):
    CATATCGCCAACGCCCGCGGCGCTTTCACCCCCAAC

    外引物F3(5):
    ACCTTTCATTTACGCCCCG
    外引物B3(5):
    CGCTTTCACCCCCAACGT
    內引物FIP(5):
    CGTTGCCAGCTCCAGACGATATTTTGTCTGACCTGGTCCGACG
    內引物BIP(5):
    AACAGCCTCCCCCTACGCGATTTTGTCCCTTTTGCCCGAGG

    外引物F3(6):
    ACCTTTCATTTACGCCCCG
    外引物B3(6):
    CGCTTTCACCCCCAACGT
    內引物FIP(6):
    CGTTGCCAGCTCCAGACGATAGTCTGACCTGGTCCGACG
    內引物BIP(6):
    AACAGCCTCCCCCTACGCGAGTCCCTTTTGCCCGAGG

    外引物F3(7):
    TGGAGCTGGCAACGACT
    外引物B3(7):
    GGAAGGCGGCATTCGG
    內引物FIP(7):
    CGGGCGTTGGCGATATGCATATTTTTGGTCTCGCCGGCAACA
    內引物BIP(7):
    TGCCCTCGGGCAAAAGGGATTTTCTGGGTCAGAGTGACCTGC

    外引物F3(8):
    TGGAGCTGGCAACGACT
    外引物B3(8):
    GGAAGGCGGCATTCGG
    內引物FIP(8):
    CGGGCGTTGGCGATATGCATATGGTCTCGCCGGCAACA
    內引物BIP(8):
    TGCCCTCGGGCAAAAGGGACTGGGTCAGAGTGACCTGC。
    2.根據權利要求1所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒,其特征在于,所述
    的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒還包括Bst?DNA聚合酶、緩沖液、dNTPs、甜菜
    堿、硫酸鎂、顯色液、穩定液和陽性對照;
    所述的緩沖液含:0.18-0.25mol/L?Tris-HCl,0.10-0.15mol/L?KCl,0.07-0.
    15mol/L(NH4)2SO4,15-30mmol/L?MgSO4,1-2體積%TritonX-100;
    所述穩定液為石蠟油。
    3.根據權利要求2所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒,其特征在于,
    所述的Bst?DNA聚合酶:酶濃度7-10U/μL;
    所述的dNTPs:每種核苷酸濃度10-20mmol/L;
    所述的甜菜堿:濃度3-6mol/L;
    所述的硫酸鎂:濃度100-200mmol/L;
    所述的顯色液為SYBR?Green?I或Eva?Green;
    所述的陽性對照為肺炎克雷伯氏菌基因組DNA。
    4.根據權利要求3所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒,其特征在于,
    所述的Bst?DNA聚合酶:酶濃度8U/μL;
    所述的緩沖液含:0.2mol/L?Tris-HCl,0.1mol/L?KCl,0.1mol/L(NH4)
    2SO4,20mmol/L?MgSO4,1體積%?TritonX-100;
    所述的dNTPs:每種核苷酸濃度10mmol/L;
    所述的甜菜堿:濃度5mol/L;
    所述的硫酸鎂:濃度150mmol/L。
    5.根據權利要求2、3或4所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒,其特征在
    于,所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒還包括反應管,所述的反應管由管體和
    管蓋兩部分組成,管體內腔的下部設有將其分隔成A、B兩個空腔的縱向延伸的
    隔板。
    6.根據權利要求5所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒,其特征在于,所述
    的A、B兩個空腔中分別裝有工作液或顯色液,兩個空腔中的液體上層均由穩定
    液封存,所述工作液為緩沖液、dNTPs、甜菜堿、硫酸鎂、水和Bst?DNA聚合
    酶的混合而成。
    展開

專利技術附圖

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