1.一種肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒，其特征在于，所述的肺炎克雷伯氏菌
檢測試劑盒包括以肺炎克雷伯氏菌的oppA基因為靶基因、基于環介導恒溫擴增
技術設計的兩對引物：內引物FIP/BIP和外引物F3/B3，所述的兩對引物為
外引物F3(1)：
TACGCCCCGGTCTGAC
外引物B3(1)：
GCGCTTTCACCCCCAAC
內引物FIP(1)：
GGCGAGACCAGTCGTTGCCATTTTCGACGGCACGGCCATT
內引物BIP(1)：
AACAGCCTCCCCCTACGCGATTTTGTCCCTTTTGCCCGAGG
或
外引物F3(2)：
TACGCCCCGGTCTGAC
外引物B3(2)：
GCGCTTTCACCCCCAAC
內引物FIP(2)：
GGCGAGACCAGTCGTTGCCACGACGGCACGGCCATT
內引物BIP(2)：
AACAGCCTCCCCCTACGCGAGTCCCTTTTGCCCGAGG
或
外引物F3(3)：
GCCATTACAGCGCAGGAT
外引物B3(3)：
TGCAGCGTGGTGTCGT
內引物FIP(3)：
GGTAGCTCGCGTAGGGGGATTTTCGTCTGGAGCTGGCAACG
內引物BIP(3)：
CATATCGCCAACGCCCGCGTTTTGCGCTTTCACCCCCAAC
或
外引物F3(4)：
GCCATTACAGCGCAGGAT
外引物B3(4)：
TGCAGCGTGGTGTCGT
內引物FIP(4)：
GGTAGCTCGCGTAGGGGGACGTCTGGAGCTGGCAACG
內引物BIP(4)：
CATATCGCCAACGCCCGCGGCGCTTTCACCCCCAAC
或
外引物F3(5)：
ACCTTTCATTTACGCCCCG
外引物B3(5)：
CGCTTTCACCCCCAACGT
內引物FIP(5)：
CGTTGCCAGCTCCAGACGATATTTTGTCTGACCTGGTCCGACG
內引物BIP(5)：
AACAGCCTCCCCCTACGCGATTTTGTCCCTTTTGCCCGAGG
或
外引物F3(6)：
ACCTTTCATTTACGCCCCG
外引物B3(6)：
CGCTTTCACCCCCAACGT
內引物FIP(6)：
CGTTGCCAGCTCCAGACGATAGTCTGACCTGGTCCGACG
內引物BIP(6)：
AACAGCCTCCCCCTACGCGAGTCCCTTTTGCCCGAGG
或
外引物F3(7)：
TGGAGCTGGCAACGACT
外引物B3(7)：
GGAAGGCGGCATTCGG
內引物FIP(7)：
CGGGCGTTGGCGATATGCATATTTTTGGTCTCGCCGGCAACA
內引物BIP(7)：
TGCCCTCGGGCAAAAGGGATTTTCTGGGTCAGAGTGACCTGC
或
外引物F3(8)：
TGGAGCTGGCAACGACT
外引物B3(8)：
GGAAGGCGGCATTCGG
內引物FIP(8)：
CGGGCGTTGGCGATATGCATATGGTCTCGCCGGCAACA
內引物BIP(8)：
TGCCCTCGGGCAAAAGGGACTGGGTCAGAGTGACCTGC。
2.根據權利要求1所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒，其特征在于，所述
的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒還包括Bst?DNA聚合酶、緩沖液、dNTPs、甜菜
堿、硫酸鎂、顯色液、穩定液和陽性對照；
所述的緩沖液含：0.18-0.25mol/L?Tris-HCl，0.10-0.15mol/L?KCl，0.07-0.
15mol/L(NH4)2SO4，15-30mmol/L?MgSO4，1-2體積％TritonX-100；
所述穩定液為石蠟油。
3.根據權利要求2所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒，其特征在于，
所述的Bst?DNA聚合酶：酶濃度7-10U/μL；
所述的dNTPs：每種核苷酸濃度10-20mmol/L；
所述的甜菜堿：濃度3-6mol/L；
所述的硫酸鎂：濃度100-200mmol/L；
所述的顯色液為SYBR?Green?I或Eva?Green；
所述的陽性對照為肺炎克雷伯氏菌基因組DNA。
4.根據權利要求3所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒，其特征在于，
所述的Bst?DNA聚合酶：酶濃度8U/μL；
所述的緩沖液含：0.2mol/L?Tris-HCl，0.1mol/L?KCl，0.1mol/L(NH4)
2SO4，20mmol/L?MgSO4，1體積％?TritonX-100；
所述的dNTPs：每種核苷酸濃度10mmol/L；
所述的甜菜堿：濃度5mol/L；
所述的硫酸鎂：濃度150mmol/L。
5.根據權利要求2、3或4所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒，其特征在
于，所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒還包括反應管，所述的反應管由管體和
管蓋兩部分組成，管體內腔的下部設有將其分隔成A、B兩個空腔的縱向延伸的
隔板。
6.根據權利要求5所述的肺炎克雷伯氏菌檢測試劑盒，其特征在于，所述
的A、B兩個空腔中分別裝有工作液或顯色液，兩個空腔中的液體上層均由穩定
液封存，所述工作液為緩沖液、dNTPs、甜菜堿、硫酸鎂、水和Bst?DNA聚合
酶的混合而成。
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