本發(fā)明涉及臨床微生物鑒定領域，提供了一種真菌快速檢測試劑盒及其檢測方法。該試劑盒包括2條通用引物擴增真菌18S，5.8S的內轉錄間隔區(qū)ITS1，1條測序引物測定內轉錄間隔區(qū)ITS1反向區(qū)段的序列，親和素標記的磁珠，測序結果與數據庫比對判斷種屬。應用此試劑盒能通過一次測序區(qū)分臨床樣本中的真菌，可用于臨床診斷。不僅為臨床診療贏得了寶貴的搶救時間，而且具有成本低廉，操作方便，特異性強的優(yōu)點。

1.一種真菌快速檢測試劑盒，其特征在于它包括：
（1）擴增真菌的內轉錄間隔區(qū)ITS1的通用引物：其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1
和SEQ?ID?NO：2所示引物對；
（2）測序引物：其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：3所示；
（3）親和素標記的磁珠；
其中，SEQ?ID?NO：1在其5’端標記生物素；
在一次檢測中共同使用。
2.根據權利要求1所述的真菌快速檢測試劑盒，其特征在于它還包括如下試劑：
（1）DNA提取試劑：Buffer?I、Buffer?II、Buffer?III；Buffer?TE；
（2）反應液：PCR?Buffer，2mM?MgCl₂，0.2mM?dNTPs，2U/μLTaq?DNA聚合酶；
（3）單鏈純化試劑：75%(v/v)乙醇溶液，0.2M?NaOH，10mM?pH?7.6Tris-Acetate溶
液，結合緩沖液，退火緩沖液；
（4）測序試劑：DNA聚合酶，ATP硫酸化酶，熒光素酶，三磷酸腺苷雙磷酸酶，
底物APS，熒光素和dNTP；
其中，
Buffer?I為9g/L?NaCl水溶液；
Buffer?II為10g/L?SDS，2%(v/v)Triton?X-100，100mmol/L?NaCl，10mmol?pH?8.0?
Tris-HCl，1mmol/L?EDTA，溶劑為水；
Buffer?III為飽和NaCl水溶液；
Buffer?TE為10mmol/L?pH?8.0Tris-HCl，1mmol/L?EDTA，溶劑為水；
PCR?Buffer具體為：0.1%(v/v)NP-40，0.02%(v/v)明膠，0.06%g/mL?BSA，
0.1%(v/v)Tween-20，0.06M?pH8.9?Tricine；
結合緩沖液具體為：10mM?Tris-HCl，2M?NaCl，1mM?EDTA，0.1%(v/v)Tween-20；
退火緩沖液具體為：20mM?pH?7.6?Tris-Acetate，2mM醋酸鎂。