本發(fā)明提供了用于產(chǎn)生靶DNA的加標(biāo)簽的DNA片段文庫的試劑盒，其包含多個(gè)轉(zhuǎn)座體復(fù)合物，其中至少一個(gè)第一轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶和包含Tn5型轉(zhuǎn)座子末端序列和第一標(biāo)簽序列的至少一個(gè)第一多核苷酸，以及第二轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶和包含Tn5型轉(zhuǎn)座子末端序列和第二標(biāo)簽序列的至少一個(gè)第二多核苷酸，和b)具有鏈置換活性的DNA聚合酶，缺乏3'到5'外切核酸酶活性的DNA聚合酶和具有3'到5'外切核酸酶活性的DNA聚合酶的摻混物，具有5'到3'外切核酸酶活性的DNA聚合酶組合物，同時(shí)缺乏鏈置換活性與缺乏5'到3'外切核酸酶活性的連接酶和DNA聚合酶，或連接酶和連接寡核苷酸中的至少之一。該試劑盒可用于產(chǎn)生5'和3'加標(biāo)簽的DNA片段以用于多種過程。

1.一種試劑盒，包含：
a）多個(gè)轉(zhuǎn)座體復(fù)合物，其中至少一個(gè)第一轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶和至少
一個(gè)第一多核苷酸，所述第一多核苷酸包含Tn5型轉(zhuǎn)座子末端序列和第一標(biāo)簽序列，以及第
二轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含高活性Tn5轉(zhuǎn)座酶和至少一個(gè)第二多核苷酸，所述第二多核苷酸包含
Tn5型轉(zhuǎn)座子末端序列和第二標(biāo)簽序列，和
b）以下之一：i) 具有鏈置換活性的DNA聚合酶組合物，ii) 缺乏3'到5'外切核酸酶活
性的DNA聚合酶和具有3'到5'外切核酸酶活性的DNA聚合酶的摻混物，iii) 具有5'到3'外
切核酸酶活性的DNA聚合酶組合物，iv) 連接酶和同時(shí)缺乏鏈置換活性與缺乏5'到3'外切
核酸酶活性的DNA聚合酶，或者v) 連接酶和連接寡核苷酸。
2.權(quán)利要求1所述的試劑盒，其中，所述第一轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含兩個(gè)第一多核苷酸，并
且所述第二轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含兩個(gè)第二多核苷酸。
3.權(quán)利要求1所述的試劑盒，其中，所述第一和第二轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含不同的序列。
4.權(quán)利要求1所述的試劑盒，其中，所述轉(zhuǎn)座體復(fù)合物包含形成發(fā)夾的單個(gè)多核苷酸。
5.權(quán)利要求4所述的試劑盒，其中，所述發(fā)夾包含切割位點(diǎn)，且所述試劑盒進(jìn)一步包含
切割酶混合物。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中，至少一個(gè)標(biāo)簽序列包含第一測(cè)序標(biāo)簽
域，且所述試劑盒進(jìn)一步包含第一測(cè)序引物，所述第一測(cè)序引物包含對(duì)應(yīng)于所述第一測(cè)序
標(biāo)簽域的部分。
7.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中，至少一個(gè)標(biāo)簽序列包含第一擴(kuò)增標(biāo)簽
域，且所述試劑盒進(jìn)一步包含DNA聚合酶和第一擴(kuò)增引物，所述第一擴(kuò)增引物具有對(duì)應(yīng)于所
述第一擴(kuò)增標(biāo)簽域的部分。
8.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中，至少一個(gè)標(biāo)簽序列包含以下任意一種或
多種：（1）限制性位點(diǎn)域，（2）轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子序列，（3）地址標(biāo)簽域，（4）捕獲標(biāo)簽域，或（5）檢測(cè)
標(biāo)簽域。
9.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的試劑盒，進(jìn)一步包含靶DNA。