本發明涉及臨床微生物鑒定領域，提供了一種快速鑒定痰樣本中細菌的試劑盒及方法。該試劑盒包括2條通用引物擴增細菌16S rRNA的V1可變區，2條特異引物屏蔽奈瑟菌屬細菌16S rRNA的可變區，2條特異引物屏蔽小韋榮球菌16S rRNA的可變區，1條測序引物測定V1正向區段的序列，親和素標記的磁珠，測序結果與數據庫比對判斷種屬。應用此試劑盒能一次測序區分痰樣本中的細菌，可用于痰樣本中細菌感染的臨床診斷。不僅為臨床診療贏得了寶貴的搶救時間，而且具有成本低廉，操作方便，特異性強的優點。

1.一種痰樣本細菌快速鑒定的試劑盒，其特征在于它包括：
(1)擴增細菌16S?rRNA的V1可變區的通用引物：其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：
1和SEQ?ID?NO：2所示引物對；
(2)屏蔽奈瑟菌屬細菌16S?rRNA的V1可變區的特異引物：其核苷酸序列如SEQ
IDNO：3和SEQIDNO：2所示引物對；
(3)屏蔽小韋榮球菌16S?rRNA的V1可變區的特異引物：其核苷酸序列如SEQ?ID
NO：4和SEQ?IDNO：2所示引物對；
(4)測序引物：其核苷酸序列如SEQ?ID?NO：2所示；
(5)親和素標記的磁珠；
其中，SEQ?ID?NO：1在其5’端標記生物素；
上述引物在一次檢測中共同使用。
2.根據權利要求1所述的痰樣本細菌快速鑒定的試劑盒，其特征在于還包括如下6
組試劑：
(1)液化試劑：0.2MNaOH；
(2)洗滌試劑：0.9％NaCl溶液；
(3)DNA提取試劑：5％(w/v)g/mL?Chelex?100緩沖液，20mg/mL蛋白酶K；
(4)反應液：PCR?Buffer，2mM?MgCl₂，0.2mM?dNTPs，2U/μL?Taq?DNA聚合酶；
(5)單鏈純化試劑：75％(v/v)乙醇溶液，0.2M?NaOH，10mM?pH?7.6Tris-Acetate，
結合緩沖液，退火緩沖液；
(6)測序試劑：DNA聚合酶，ATP硫酸化酶，熒光素酶，三磷酸腺苷雙磷酸酶，
底物APS，熒光素和dNTP。