1.一種用于檢測沙丁胺醇的量子點(diǎn)免疫熒光試劑盒，包括量子點(diǎn)標(biāo)記的特異性抗體；
所述抗體是以式Ⅰ所示化合物與載體蛋白偶聯(lián)的偶聯(lián)物作為免疫原得到的:
![]()
式Ⅰ；
所述式Ⅰ所示化合物是由如下步驟制得而成：
中間體sal-1合成：250ml三口瓶中加入2-溴-1-[4-羥基-3-(羥甲基)苯基]乙-1-酮
1000mg，二氯甲烷200ml，對甲苯磺酸3.8mg，冰浴降溫至0-5℃，滴加2,2- 甲氧基丙烷
2208ul，室溫反應(yīng)過夜，TLC檢測反應(yīng)完全后處理，飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機(jī)相，無水硫
酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得類白色固體1211mg（sal-1）；中間體sal-2合成：100ml三口瓶中
加入中間體sal-1 1140mg，無水甲醇40ml，冰浴降溫至0℃，加入硼氫化鈉227mg，0-5℃反應(yīng)
2小時(shí)，TLC檢測反應(yīng)完全后處理，反應(yīng)液傾倒入冰水中，二氯甲烷萃取，飽和氯化鈉水溶液
洗滌有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得類白色固體1018mg（sal-2）；中間體sal-3
合成：100ml三口瓶中加入中間體sal-2 1000mg，無水甲醇40ml，冰浴降溫至0℃，加無水碳
酸鉀1396mg，室溫反應(yīng)2小時(shí)，TLC檢測反應(yīng)完全后處理，過濾，5ml甲醇洗滌濾餅，濾液減壓
濃縮得油狀物體700mg（sal-3）；中間體sal-4合成：100ml三口瓶中加入中間體sal-3
700mg，無水甲醇40ml，加三乙胺686mg，6-氨基-6-甲基-1-庚酸540mg，回流反應(yīng)12小時(shí)，TLC
檢測反應(yīng)完全后處理，減壓蒸除甲醇，二氯甲烷溶解殘留物，水洗，飽和氯化鈉水溶液洗滌
有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓濃縮得油狀物1008mg（sal-4）；半抗原sal-5合成：
100ml三口瓶中加入中間體sal-4 1000mg，無水甲醇40ml，冰浴降溫至0-5℃，滴加1M硫酸
10ml室溫反應(yīng)2小時(shí)，TLC檢測反應(yīng)完全后處理，減壓蒸除甲醇，降溫至10℃析出白色固體，
過濾，少量水洗滌濾餅，干燥后得白色固體600mg（sal-5），得到的干物質(zhì)即為半抗原；
所述式Ⅰ所示化合物與載體蛋白偶聯(lián)的偶聯(lián)物的制備方法包括如下步驟：
稱取7.3mg半抗原溶于2ml DMF，加入EDC 4.3mg，NHS 5.2mg，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2h；取50mg
BSA溶于5ml 0.1M碳酸鈉緩沖液；將得到的半抗原溶液逐滴加入到蛋白溶液中，室溫?cái)嚢璺?br/>應(yīng)24h，PBS 4℃透析72小時(shí)，期間換透析液6次；將透析液在無菌條件下過0.22 μm孔徑的濾
膜，分裝于安培瓶中，-20℃保存；
所述量子點(diǎn)標(biāo)記的特異性抗體是通過如下方法制備獲得的：
①取2.5mg量子點(diǎn)，用pH4.7、0.1M的MES緩沖液洗滌，然后用1ml pH4.7、0.1M的MES緩沖
液重懸，加入0.96mg EDC和1.15mg NHS，37℃反應(yīng)30分鐘，20000rpm離心5min，收集沉淀，即
為活化后的量子點(diǎn)；
②取步驟①得到的活化后的量子點(diǎn)，用pH8.5、50mM的硼砂緩沖液洗滌，然后將2.5mg活
化后量子點(diǎn)、所述蛋白質(zhì)含量為0.15mg的抗體和pH8.5、50mM的硼砂緩沖液混勻，總體積為
0.8ml，25℃反應(yīng)3.5小時(shí)；
③取完成步驟②的液相，加入BSA并使其質(zhì)量百分含量為5%，37℃反應(yīng)30分鐘，
20000rpm離心5min，收集沉淀，用pH7.4、0.02M的PBS緩沖液洗滌，用1ml pH7.4、0.02M的PBS
緩沖液重懸；
④取步驟③得到的液相，用pH7.4、0.02M的PBS緩沖液稀釋至150000倍體積。
2.權(quán)利要求1所述的一種用于檢測沙丁胺醇的量子點(diǎn)免疫熒光試劑盒，其特征在于，它
包括：包被有沙丁胺醇抗原的微孔板、沙丁胺醇標(biāo)準(zhǔn)溶液、稀釋液、濃縮洗滌液、抗體工作
液。
