1.一種非疾病診斷或治療目的的對可能存在于生物樣品中的傳染
病病原體進行檢測的方法,包括:
(ⅰ)擴增生物樣品的核酸片段,所述核酸片段為EB病毒的EBNA-1
基因的如SEQ?ID?NO.1所示的核酸片段或其與以下各種核酸片段的組
合:
單純皰疹病毒的UL30基因的如SEQ?ID?NO.2所示的核酸片段;
巨細胞病毒的UL83基因的如SEQ?ID?NO.3所示的核酸片段;
腺病毒的外殼蛋白六聚體基因的如SEQ?ID?NO.4所示的核酸片段;
(ⅱ)用探針進行檢測,所述探針與步驟(ⅰ)擴增產物中的一種特
異性雜交;
所述步驟(ⅰ)使用第1組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.1所示的核
酸片段,其上游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.5所示,其下游引物核苷
酸序列如SEQ?ID?NO.6所示或其與以下各組的組合作為引物進行擴增:
第2組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.2所示的核酸片段,其上游引物
核苷酸序列如SEQ?ID?NO.8所示,其下游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.9
所示;
第3組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.3所示的核酸片段,其上游引物
核苷酸序列如SEQ?ID?NO.11所示,其下游引物核苷酸序列如SEQ?ID
NO.12所示;
第4組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.4所示的核酸片段,其上游引物核
苷酸序列如SEQ?ID?NO.14所示,下游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.15
所示;
所述步驟(ⅰ)利用NASBA技術擴增樣品的核酸片段,NASBA運
行條件為41℃~45℃溫育90~150分鐘;
步驟(ⅱ)中所述探針與步驟(ⅰ)所得擴增產物的雜交在固體支
持物上進行;
所述步驟(ⅱ)使用捕獲探針,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.17所示,
所述捕獲探針直接或間接的連接在固體支持物上;
步驟(ⅱ)中使用以下的核苷酸序列作為檢測探針:
如SEQ?ID?NO.7所示,檢測如SEQ?ID?NO.1所示的核酸片段;
如SEQ?ID?NO.10所示,檢測如SEQ?ID?NO.2所示的核酸片段;
如SEQ?ID?NO.13所示,檢測如SEQ?ID?NO.3所示的核酸片段;
如SEQ?ID?NO.16所示,檢測如SEQ?ID?NO.4所示的核酸片段。
2.一種對可能存在于生物樣品中的傳染病病原體進行檢測的試劑
盒,其包含用于擴增如SEQ?ID?NO.1所示的核酸片段的引物或其與用于
擴增如SEQ?ID?NO.2所示的核酸片段的引物、用于擴增如SEQ?ID?NO.3
所示的核酸片段的引物和用于擴增SEQ?ID?NO.4所示的核酸片段的引物
中的一組或一組以上的組合;
所述引物選自:
第1組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.1所示的核酸片段,其上游引物
核苷酸序列如SEQ?ID?NO.5所示,其下游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.6
所示;
第2組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.2所示的核酸片段,其上游引物
核苷酸序列如SEQ?ID?NO.8所示,其下游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.9
所示;
第3組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.3所示的核酸片段,其上游引物
核苷酸序列如SEQ?ID?NO.11所示,其下游引物核苷酸序列如SEQ?ID
NO.12所示;
第4組引物用于擴增如SEQ?ID?NO.4所示的核酸片段,其上游引物
核苷酸序列如SEQ?ID?NO.14所示,下游引物核苷酸序列如SEQ?ID?NO.15
所示;
還包含如核苷酸序列SEQ?ID?NO.17所示的捕獲探針。
還包含以下至少一種與引物對應的檢測探針:
如SEQ?ID?NO.7所示,檢測如SEQ?ID?NO.1所示的核酸片段;
如SEQ?ID?NO.10所示,檢測如SEQ?ID?NO.2所示的核酸片段;
如SEQ?ID?NO.13所示,檢測如SEQ?ID?NO.3所示的核酸片段;
如SEQ?ID?NO.16所示,檢測如SEQ?ID?NO.4所示的核酸片段。
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