1.一種PCR引物，其特征是，包含所有如下針對目標基因突變位點設計的引物序列：針
對AKT1基因的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，針對AKT3基因的SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4，
針對APC基因的SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8，針對ATM基因的
SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10，針對BRAF基因的SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12，SEQ ID NO:
13和SEQ ID NO:14，針對CDH1基因的SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16，針對CDKN2A基因的SEQ
ID NO:17和SEQ ID NO:18，針對CTNNB1基因的SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20，針對CYP2D6
基因的SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22，SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24，針對CYP3A5基因的
SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26，針對DPYD基因的SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28，針對EGFR
基因的SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30，針對ERCC1基因的SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32，針
對ERCC2基因的SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34，針對FGFR1基因的SEQ ID NO:35和SEQ ID
NO:36，針對FGFR2基因的SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38，針對FGFR3基因的SEQ ID NO:39和
SEQ ID NO:40，針對FLT3基因的SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42，針對GSTP1基因的SEQ ID
NO:43和SEQ ID NO:44，針對HER2基因的SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46，針對HRAS基因的
SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48，針對IDH1基因的SEQ ID NO:49和SEQ ID NO:50，針對IDH2
基因的SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52，針對KIT基因的SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54，針對
KRAS基因的SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56，SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58，針對MEK1基因
的SEQ ID NO:59和SEQ ID NO:60，針對MET基因的SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62，針對
MTHFR基因的SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64，SEQ ID NO:65和SEQ ID NO:66，針對NRAS基因
的SEQ ID NO:67和SEQ ID NO:68，針對PDGFRA基因的SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70，針對
PIK3CA基因的SEQ ID NO:71和SEQ ID NO:72，針對PIK3R1基因的SEQ ID NO:73和SEQ ID
NO:74，針對PIK3R5基因的SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76，針對PTEN基因的SEQ ID NO:77和
SEQ ID NO:78，針對PTPN11基因的SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80，針對RB1基因的SEQ ID
NO:81和SEQ ID NO:82，針對STK11基因的SEQ ID NO:83和SEQ ID NO:84，SEQ ID NO:85和
SEQ ID NO:86，針對TP53基因的SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88，針對TPMT基因的SEQ ID
NO:89和SEQ ID NO:90，針對TSC1基因的SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92，針對TYMS基因的
SEQ ID NO:93和SEQ ID NO:94，針對UGT1A1基因的SEQ ID NO:95和SEQ ID NO:96，針對
VEGFA基因的SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:98，針對VEGFR2基因的SEQ ID NO:99和SEQ ID
NO:100，針對VEGFR3基因的SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:102，針對VHL基因的SEQ ID NO:
103和SEQ ID NO:104，針對XRCC1基因的SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106。
2.一種標簽PCR引物，其特征是，由權利要求1所述的PCR引物以及連接于每對引物中至
少一條的5’端的DNA標簽序列組成，所述DNA標簽序列選自SEQ ID NO:107—SEQ ID NO:
126。
3.一種DNA標簽構建測序文庫的方法，其特征是，主要包括以下步驟：
A.分別提取至少一個待檢測樣本中的DNA；
B.采用針對目標基因突變位點的權利要求2所述的標簽PCR引物，PCR擴增不同的待測
樣品，針對不同的待測樣品的標簽PCR引物中的DNA標簽序列不同；
C.純化回收PCR擴增產物，并將不同待測樣品的擴增產物混合，構成核酸測序文庫。
4.根據權利要求3所述的DNA標簽構建測序文庫的方法，其特征是，待檢測樣本的數量
為1-20個。
5.根據權利要求4所述的DNA標簽構建測序文庫的方法，其特征是，待檢測樣本的數量
為20個。
6.一種高通量測序的方法，其特征是，主要包括以下步驟：
A、采用權利要求3-5任一項的DNA標簽構建測序文庫的方法，建立核酸測序文庫；
B、將核酸測序文庫依次進行末端修復、連接接頭以及純化回收連接產物；
C、對上述連接產物進行測序，以確定所述核酸測序文庫的序列信息。
7.根據權利要求6所述的高通量測序的方法，其特征是，所述步驟B中接頭的堿基序列
如SEQ ID NO:127和SEQ ID NO:128所示。
8.一種DNA標簽構建測序文庫的試劑盒，其特征是，包含有：針對不同樣品的不同PCR引
物組，所述每組PCR引物組中包含有53對PCR引物對，且每對PCR引物對中至少一條的5’端連
接有DNA標簽序列，所述同一引物組的DNA標簽序列相同，不同引物組的DNA標簽序列不同，
所述DNA標簽序列選自SEQ ID NO:107—SEQ ID NO:126，所述PCR引物對如權利要求1所述。
9.根據權利要求8所述的DNA標簽構建測序文庫的試劑盒，其特征是，包括有針對不同
樣品的20組PCR引物組，該20組標簽PCR引物中的DNA標簽序列選自SEQ ID NO:107—SEQ ID
NO:126，且每組中的DNA標簽序列各不相同，每組標簽PCR引物中的PCR引物序列為：針對
AKT1基因的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，針對AKT3基因的SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4，針
對APC基因的SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6，SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8，針對ATM基因的SEQ
ID NO:9和SEQ ID NO:10，針對BRAF基因的SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12，SEQ ID NO:13和
SEQ ID NO:14，針對CDH1基因的SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16，針對CDKN2A基因的SEQ ID
NO:17和SEQ ID NO:18，針對CTNNB1基因的SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20，針對CYP2D6基因
的SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22，SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24，針對CYP3A5基因的SEQ
ID NO:25和SEQ ID NO:26，針對DPYD基因的SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28，針對EGFR基因
的SEQ ID NO:29和SEQ ID NO:30，針對ERCC1基因的SEQ ID NO:31和SEQ ID NO:32，針對
ERCC2基因的SEQ ID NO:33和SEQ ID NO:34，針對FGFR1基因的SEQ ID NO:35和SEQ ID NO:
36，針對FGFR2基因的SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38，針對FGFR3基因的SEQ ID NO:39和SEQ
ID NO:40，針對FLT3基因的SEQ ID NO:41和SEQ ID NO:42，針對GSTP1基因的SEQ ID NO:43
和SEQ ID NO:44，針對HER2基因的SEQ ID NO:45和SEQ ID NO:46，針對HRAS基因的SEQ ID
NO:47和SEQ ID NO:48，針對IDH1基因的SEQ ID NO:49和SEQ ID NO:50，針對IDH2基因的
SEQ ID NO:51和SEQ ID NO:52，針對KIT基因的SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54，針對KRAS基
因的SEQ ID NO:55和SEQ ID NO:56，SEQ ID NO:57和SEQ ID NO:58，針對MEK1基因的SEQ
ID NO:59和SEQ ID NO:60，針對MET基因的SEQ ID NO:61和SEQ ID NO:62，針對MTHFR基因
的SEQ ID NO:63和SEQ ID NO:64，SEQ ID NO:65和SEQ ID NO:66，針對NRAS基因的SEQ ID
NO:67和SEQ ID NO:68，針對PDGFRA基因的SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70，針對PIK3CA基因
的SEQ ID NO:71和SEQ ID NO:72，針對PIK3R1基因的SEQ ID NO:73和SEQ ID NO:74，針對
PIK3R5基因的SEQ ID NO:75和SEQ ID NO:76，針對PTEN基因的SEQ ID NO:77和SEQ ID NO:
78，針對PTPN11基因的SEQ ID NO:79和SEQ ID NO:80，針對RB1基因的SEQ ID NO:81和SEQ
ID NO:82，針對STK11基因的SEQ ID NO:83和SEQ ID NO:84，SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:
86，針對TP53基因的SEQ ID NO:87和SEQ ID NO:88，針對TPMT基因的SEQ ID NO:89和SEQ
ID NO:90，針對TSC1基因的SEQ ID NO:91和SEQ ID NO:92，針對TYMS基因的SEQ ID NO:93
和SEQ ID NO:94，針對UGT1A1基因的SEQ ID NO:95和SEQ ID NO:96，針對VEGFA基因的SEQ
ID NO:97和SEQ ID NO:98，針對VEGFR2基因的SEQ ID NO:99和SEQ ID NO:100，針對VEGFR3
基因的SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:102，針對VHL基因的SEQ ID NO:103和SEQ ID NO:104，
和針對XRCC1基因的SEQ ID NO:105和SEQ ID NO:106。
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