本發明涉及一種石油降解菌的篩選方法，所述方法中使用的富集培養基、篩選培養基和馴化培養基是以石油作為唯一碳源的培養基，具體的是在培養基中加入石油和聚山梨酯?80的增溶液。本發明的有益效果是:本發明以非離子表面活性劑聚山梨脂?80作為增溶劑，能夠提高石油在水中的溶解效果，解決石油在培養基中溶解難的問題；本發明真正做到以石油為唯一碳源，在石油降解菌的初篩、馴化及純化等過程中培養基均以石油聚山梨酯?80增溶液為碳源；本發明專利中石油降解菌的篩選包括初篩、馴化及純化等過程，菌株在石油濃度梯度逐漸升高的馴化培養基中，逐漸被馴化，適應以石油為單一碳源的生長繁殖，提高其對石油的耐受力及其降解效率。

1.一種石油降解菌的篩選方法，其特征在于所述方法中使用的富集培養基、篩選培養基和馴化培養基是以石油作為唯一碳源的培養基，具體的是在培養基中加入石油和聚山梨酯-80的增溶液；所述石油和聚山梨酯-80的增溶液中石油質量濃度為2%，聚山梨酯-80質量濃度為4%，剩余為水。2.根據權利要求1所述的一種石油降解菌的篩選方法，其特征在于具體的步驟為：1）菌源的采集取煉油廠常年被石油污染的土壤作為石油降解土著菌菌源；2）石油降解土著菌的初篩(1) 取作為石油降解土著菌菌源的土壤樣品，加入盛有無菌水的錐形瓶中，置于振蕩培養箱中室溫振蕩0.5～2h，振蕩頻率為200rpm；(2) 從步驟（1）的錐形瓶中取上清液，接入富集培養基，在溫度30℃、轉速175 rpm搖床上振蕩培養48h；取培養后的富集液涂布到篩選培養基平板上，30℃恒溫培養48h；3）馴化用接種環挑取上述初篩得到的多株單一菌株在馴化培養基中進行接種馴化；4）菌種的純化（1）取馴化后的培養液，在含油平板上劃線，30℃培養7 d；（2）從含油平板上挑取單菌落轉接LB斜面，30℃培養24 h；（3）由LB斜面再次接種含油平板；（4）重復上述步驟，直至得到形態單一的純化菌落；（5）純化后的菌落接種于菌種保藏培養基斜面上，30℃培養24h后，保存于4℃冰箱中，備用。3.根據權利要求2所述的一種石油降解菌的篩選方法，其特征在于步驟3）馴化具體的為：先用接種環挑取初篩得到的多株單一菌株分別接種到100mL馴化培養基A中，培養一個周期，在溫度30℃、轉速175 rpm恒溫振蕩下培養7d為一個周期，然后從馴化培養基A中取出10mL培養液加入到90mL的馴化培養基B中，培養一個周期；再從馴化培養基B中取出10mL培養液加入到90mL馴化培養基C中，培養一個周期；從馴化培養基C中取出10mL培養液加入到90mL馴化培養基D中，培養一個周期；從馴化培養基D中取出10mL培養液加入到90mL的馴化培養基E中，培養一個周期，從馴化培養基A到馴化培養基E，石油濃度梯度逐級升高。4.根據權利要求3所述的一種石油降解菌的篩選方法，其特征在于：所述富集培養基為：含石油0.025g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，NaCl 0.5g，(NH₄)₂SO₄ 0.1g，MgSO₄·7H₂O 0.025g，KNO₃ 0.24g，KH₂PO₄ 0.57g，pH值7.2，蒸餾水1000mL，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；所述篩選培養基為：含石油0.025g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，瓊脂20g，NaCl 0.5g，(NH₄)₂SO₄ 0.1g，MgSO₄·7H₂O 0.025g，KNO₃ 0.24g，KH₂PO₄ 0.57g，pH值7.2，蒸餾水1000mL，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；所述馴化培養基A為：含石油0.025g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，NaCl 10g，NH₄NO₃ 1g，KH₂PO₄ 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O 1.31g，MgSO₄·7H₂O 1.03g，CaCl₂ 0.2g，微量元素溶液1 mL，蒸餾水1000 mL，pH值7.2，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；所述馴化培養基B為：含石油0.050g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，NaCl 10g，NH₄NO₃ 1g，KH₂PO₄ 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O 1.31g，MgSO₄·7H₂O 1.03g，CaCl₂ 0.2g，微量元素溶液1 mL，蒸餾水1000 mL，pH值7.2，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；所述馴化培養基C為：含石油0.075g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，NaCl 10g，NH₄NO₃ 1g，KH₂PO₄ 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O 1.31g，MgSO₄·7H₂O 1.03g，CaCl₂ 0.2g，微量元素溶液1 mL，蒸餾水1000 mL，pH值7.2，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；所述馴化培養基D為：含石油0.100g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，NaCl 10g，NH₄NO₃ 1g，KH₂PO₄ 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O 1.31g，MgSO₄·7H₂O 1.03g，CaCl₂ 0.2g，微量元素溶液1 mL，蒸餾水1000 mL，pH值7.2，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；所述馴化培養基E為：含石油0.125g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，NaCl 10g，NH₄NO₃ 1g，KH₂PO₄ 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O 1.31g，MgSO₄·7H₂O 1.03g，CaCl₂ 0.2g，微量元素溶液1 mL，蒸餾水1000 mL，pH值7.2，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；所述含油平板用培養基為：含石油0.125g當量的石油聚山梨酯-80增溶液，NaCl 10g，NH₄NO₃ 1g，KH₂PO₄ 0.5g，K₂HPO₄·3H₂O 1.31g，MgSO₄·7H₂O 1.03g，CaCl₂ 0.2g，微量元素溶液1 mL，瓊脂20g，蒸餾水1000 mL，pH值7.2，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；LB斜面用培養基為：蛋白胨10g，酵母粉5g，NaCl 5g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，pH值7.0，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min；微量元素溶液：MnSO₄ 39.9mg，ZnSO₄·7H₂O 42.8mg，FeCl₂·4H₂O 15.73mg，CuSO₄40mg，蒸餾水1000mL；菌種保藏培養基：牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，pH值7.2～7.4，0.1MPa，121℃，高壓蒸汽滅菌20min。