1.一種利用黃芩毛狀根生產黃芩苷的方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)按照5~8g/L的接種量,將黃芩毛狀根接種到種子培養基,110r/min、
25~28℃避光培養15~40d,獲得黃芩毛狀根種子;所述的種子培養基為添
加30~50g/L葡萄糖或蔗糖、0~0.3mmol/L苯丙氨酸的MS培養液;
再按照5~10g/L接種量,將毛狀根種子接種于發酵培養基,110r/min、
20~28℃避光培養20~30d,收獲黃芩毛狀根;所述的發酵培養基為添加
0.4~0.7mmol/L苯丙氨酸、50~70g/L蔗糖或葡萄糖的MS培養液;
2)將收獲的黃芩毛狀根加入到其質量10~20倍的水中,煎煮90~120
min,過濾收集濾液并濃縮,然后調節其pH為1.5~2.0,60~80℃保溫30~
45min,靜置后過濾;
將沉淀物用水溶解并調節pH為6.5~7.0,再添加1~3倍的乙醇,過濾
收集濾液并調節pH為7.5~8.5,靜置后過濾;
將濾液調pH為1.5~2.0,60~80℃保溫30~45min,靜置,過濾,乙
醇洗滌沉淀物,干燥后得到黃芩苷;
所述的黃芩毛狀根種子培養級數由發酵培養的規模確定,分為兩級培
養:
按照5~8g/L的接種量,將黃芩毛狀根接種到種子一級培養基,110
r/min、25~28℃避光培養15~20d,獲得黃芩毛狀根一級種子;按照5~10g/L
的接種量,將黃芩毛狀根一級種子接種到種子二級培養基,110r/min、25℃
避光培養15~18d獲得毛狀根二級種子;
所述的種子一級培養基為添加30~50g/L葡萄糖或蔗糖的MS培養液,
種子二級培養基為添加30~50g/L葡萄糖或蔗糖、0.1~0.3mmol/L苯丙氨酸
的MS培養液;
所述的毛狀根種子接種于發酵培養基之后,在前18~22d在26~28℃
培養,在后2~12d在20~22℃培養;
所述的將黃芩毛狀根煎煮之后的濾液濃縮1/3~2/3。
展開