本發(fā)明公開(kāi)了一種豬源A型流感病毒頭部蛋白及其制備方法和應(yīng)用，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。使用本發(fā)明所提供的方法可以提高流感病毒HA的產(chǎn)量，每?jī)缮囵B(yǎng)基可以得到純化的HA蛋白大于200毫克。只需5-6天即可得到一批純化的蛋白，縮短生產(chǎn)時(shí)間。此外，由于不會(huì)使用流感病毒因此可以保證疫苗的生物安全性，不會(huì)出現(xiàn)散毒的危險(xiǎn)，而且不需要雞胚擴(kuò)增病毒大大降低了生產(chǎn)成本，具有很好的應(yīng)用前景。

1.一種豬源A型流感病毒頭部蛋白，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
2.一種產(chǎn)權(quán)利要求1所述豬源A型流感病毒頭部蛋白的基因工程菌，其特征在
于所述基因工程菌為表達(dá)SEQ?ID?NO.1所示蛋白質(zhì)的大腸桿菌BL21。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基因工程菌，其特征在于所述工程菌使用分泌型表達(dá)
載體。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基因工程菌，其特征在于所述表達(dá)載體為pET系列。
5.一種制備權(quán)利要求1所述豬源A型流感病毒頭部蛋白的方法，其特征在于包
括如下步驟：
（1）根據(jù)GenBank:FJ966082.1序列，人工合成編碼SEQ?ID?NO.1所述蛋白質(zhì)的
核苷酸序列SEQ?ID?NO.4；
（2）將步驟（1）中得到的核苷酸片段克隆到表達(dá)載體pET21a；
（3）將步驟(2)得到的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21；
（4）誘導(dǎo)表達(dá)權(quán)利要求1所述蛋白質(zhì)；
（5）純化步驟（4）得到的蛋白質(zhì)，得到大量包涵體；
（6）將步驟（5）得到的包涵體進(jìn)行復(fù)性處理，制備有活性的病毒蛋白。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于所述誘導(dǎo)條件為：菌體OD600達(dá)到
0.4左右時(shí)加入IPTG至終濃度0.1mM,37℃誘導(dǎo)4小時(shí)，6000rpm離心收獲菌體。
7.權(quán)利要求1所述流感病毒頭部蛋白在制備亞單位疫苗中的應(yīng)用。