本發明所述的一種微生物發酵生產低溫纖維素酶的方法是將產生纖維素酶的微生物逐級低溫馴化，使其在低溫環境中生長良好；將低溫馴化后的纖維素酶產生菌在10～16℃逐級擴大培養，按發酵液體積的3～9％接種量接入液體發酵培養基中，在10～16℃培養72～144h時，即微生物發酵生產低溫纖維素酶結束；發酵液在4,000～8,000rpm離心收集液體，收集的液體即為粗酶液；根據不同需要和使用對象不同，可以將粗酶液進一步濃縮、分離純化，制備成不同活性、純度和劑型的酶制劑。

1.一種微生物發酵生產低溫纖維素酶的方法，其包括以下步驟：(1)將產生纖維素酶的微生物逐級低溫馴化，馴化溫度由高到低，25℃→22℃→20℃→18℃→16℃→14℃→12℃→10℃，使其在低溫環境中生長良好；菌種低溫馴化培養基：馬鈴薯50.0～100.0g，新華濾紙粉5.0～8.0g，麩皮2.0～6.0g，瓊脂20.0g，蒸餾水1.0L，pH值自然，121℃高壓蒸氣滅菌30min；(2)按常規方法將低溫馴化后的纖維素酶產生菌在10～16℃逐級擴大培養，制備成液體一級種子和二級種子；液體種子培養基：水稻秸稈粉3.0～5.0g，蛋白胨0.5～1.0g，Tween80?0.1～0.3g，(NH₄)₂SO₄?0.8～1.2g，KH₂PO₄?1.2～1.8g，尿素0.2～0.4g，MgSO₄0.2～0.3g，CaCl₂?0.1～0.2g，ZnSO₄·7H₂O?1.2mg，MnSO₄·H₂O?1.6mg，CoCl₂1.8mg，自來水1.0L，pH值自然，121℃高壓蒸氣滅菌30min；(3)將液體一級種子或二級種子，按發酵液體積的3～9％接種量接入產酶培養基中，在10～16℃培養72～144h時，即微生物發酵生產低溫纖維素酶結束；產酶培養基：水稻秸稈粉7.0～12.0g，麩皮1.0～5.0g，Tween80?0.1～0.4g，(NH₄)₂SO₄?1.0～1.5g，KH₂PO₄?1.4～2.0g，尿素0.2～0.6g，MgSO₄?0.1～0.4g，CaCl₂?0.2～0.3g，ZnSO₄·7H₂O?2.4mg，MnSO₄·H₂O?3.2mg，CoCl₂?3.6mg，自來水1.0L，pH值6.0，121℃高壓蒸氣滅菌30min；(4)將(3)的發酵液在4,000～8,000rpm離心收集液體，收集到的液體即為粗酶液；(5)根據不同需要和使用對象不同，將(4)得到的粗酶液進一步濃縮、分離純化，制備成不同活性、純度和劑型的酶制劑。