本發明為凝結芽孢桿菌益生菌制劑的制備，屬于益生菌制劑技術領域，所述益生菌制劑由固態發酵制備，固態發酵培養方法為：首先接種凝結芽孢桿菌HM?09，2.0?8.0%(v/w)，溫度32?42℃,濕度70?85%，至pH降至6.5?6.8，接種乳雙歧桿菌V9，3.0?5.0%(v/w)，溫度32?37℃,濕度70?80%，混合培養24?48h后經流化床干燥獲得。凝結芽孢桿菌HM?09保藏號：CGMCCNo.6729；乳雙歧桿菌V9保藏號：CGMCCNo.5470。本發明利用分段接種技術，混菌發酵對菌種的生長、增殖具有互相促進作用，發酵后產品的色澤和口感等感官特征得到改善和多樣化，同時提高了營養物質降解率。

1.一種凝結芽孢桿菌益生菌制劑，所述益生菌制劑由固態發酵制備，包括菌種培養及其固態
發酵培養，其特征在于，固態發酵培養方法為：首先接種凝結芽孢桿菌HM-09，接種量為
2.0-8.0％，控制發酵溫度32-42℃,濕度70-85％，至pH降至6.5-6.8，接種動物雙歧桿菌乳亞
種V9，接種量為3.0-5.0％，控制發酵溫度32-37℃,濕度70-80％，混合培養24-48h；
固態發酵培養基質量比例組成為：豆粕：麩皮：玉米粉＝10:8-10:0.5-1，水份含量控制
在40-75％，pH7.0-7.2；
所述接種量單位為體積重量百分比；
所述凝結芽孢桿菌HM-09(Bacillus coagulans)，保藏號：CGMCC No.6729；
所述動物雙歧桿菌乳亞種V9(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)，保藏號：
CGMCC No.5470。
2.根據權利要求1所述凝結芽孢桿菌益生菌制劑，其特征在于，所述凝結芽孢桿菌HM-09的種
子培養基組成如下：蛋白胨10.0-15.0g，酵母膏10.0-15.0g，葡萄糖5.0-10.0g，MgSO₄·7H₂O
0.5-1.0g，K₂HPO₄1.0-2.0g，MnSO₄50-100mg，加入1L蒸餾水，調節pH至7.0-7.2；動物雙
歧桿菌乳亞種V9的種子培養基組成為：蛋白胨20-50g，葡萄糖20-50g，加水至1L，pH7.0-7.2。
3.根據權利要求1所述凝結芽孢桿菌益生菌制劑，其特征在于，所述凝結芽孢桿菌HM-09的
種子培養條件為：放置于搖床上，轉速為160-180r/min，溫度為35-45℃，培養20-24h；
所述動物雙歧桿菌乳亞種V9種子培養條件為30-38℃，靜置培養20-24h。
4.根據權利要求1所述凝結芽孢桿菌益生菌制劑，其制備方法包括菌種培養及其固態發酵培
養；其特征在于，
首先接種凝結芽孢桿菌HM-09，接種量為5.0％，培養溫度37℃,濕度80％，至pH降至
6.5，接種動物雙歧桿菌乳亞種V9，接種量為3.0％，控制發酵溫度37℃,濕度80％，共計混
合培養48h；
所述接種量單位為體積重量百分比；
所述凝結芽孢桿菌HM-09的種子培養條件為：放置于搖床上，轉速為170r/min，溫度
為37℃，培養24h；
所述動物雙歧桿菌乳亞種V9的種子培養條件為37℃，靜置培養24h；
所述凝結芽孢桿菌HM-09的種子培養基組成如下：蛋白胨10.0g，酵母膏10.0g，葡萄
糖6.0g，MgSO₄·7H₂O 1.0g，K₂HPO₄2.0g，MnSO₄50mg，加入1L蒸餾水，調節pH至7.0-7.2；
動物雙歧桿菌乳亞種V9的種子培養基組成為：蛋白胨20g，葡萄糖20g，加水至1L，pH
7.0-7.2；
所述固態發酵的培養基質量比例組成為：豆粕：麩皮：玉米粉＝10:10:0.5，水份含量控
制在60％，115℃高壓滅菌25min。
5.根據權利要求4所述凝結芽孢桿菌益生菌制劑，其特征在于，發酵制品中凝結芽孢桿菌HM-09
活菌數為2.90×10⁹CFU/g，動物雙歧桿菌乳亞種V9活菌數為5.22×10⁸CFU/g，游離氨基態氮
的含量為318.2umol/g。
6.權利要求1-5任一所述凝結芽孢桿菌益生菌制劑的制備方法，步驟包括菌種培養及其固態發
酵培養，其特征在于，固態發酵培養方法為：首先接種凝結芽孢桿菌HM-09，接種量為2.0-8.0％，
控制發酵溫度32-42℃,濕度70-85％，至pH降至6.5-6.8，接種動物雙歧桿菌乳亞種V9，接種
量為3.0-5.0％，控制發酵溫度32-37℃,濕度70-80％，混合培養24-48h；
所述接種量單位為體積重量百分比；
所述凝結芽孢桿菌HM-09(Bacillus coagulans)，保藏號：CGMCC No.6729；
所述動物雙歧桿菌乳亞種V9(Bifidobacterium animalis subsp.lactis)，保藏號：
CGMCC No.5470；
所述凝結芽孢桿菌HM-09的種子培養基組成如下：蛋白胨10.0-15.0g，酵母膏10.0-15.0
g，葡萄糖5.0-10.0g，MgSO₄·7H₂O 0.5-1.0g，K₂HPO₄1.0-2.0g，MnSO₄50-100mg，加入
1L蒸餾水，調節pH至7.0-7.2；動物雙歧桿菌乳亞種V9的種子培養基組成為：蛋白胨20-50g，
葡萄糖20-50g，加水至1L，pH7.0-7.2；固態發酵培養基質量比例組成為：豆粕：麩皮：玉
米粉＝10:8-10:0.5-1，水份含量控制在40-75％，pH7.0-7.2；
所述凝結芽孢桿菌HM-09的種子培養條件為：放置于搖床上，轉速為160-180r/min，溫
度為35-45℃，培養20-24h；所述動物雙歧桿菌乳亞種V9的種子培養條件為30-38℃，靜置
培養20-24h。
7.根據權利要求6所述凝結芽孢桿菌益生菌制劑的制備方法，包括菌種培養及其固態發酵培
養，發酵結束后經流化床干燥獲得干燥的培養物，其特征在于，首先接種凝結芽孢桿菌HM-09，
接種量為5.0％，培養溫度37℃,濕度80％，至pH降至6.5，接種動物雙歧桿菌乳亞種V9，
接種量為3.0％，控制發酵溫度37℃,濕度80％，共計混合培養48h；
所述接種量單位為體積重量百分比；
所述凝結芽孢桿菌HM-09種子的培養條件為：放置于搖床上，轉速為170r/min，溫度為
37℃，培養24h；
所述動物雙歧桿菌乳亞種V9的種子培養條件為37℃，靜置培養24h；
所述凝結芽孢桿菌HM-09的種子培養基組成如下：蛋白胨10.0g，酵母膏10.0g，葡萄
糖6.0g，MgSO₄·7H₂O 1.0g，K₂HPO₄2.0g，MnSO₄50mg，加入1L蒸餾水，調節pH至7.0-7.2；
動物雙歧桿菌乳亞種V9的種子培養基組成為：蛋白胨20g，葡萄糖20g，加水至1L，pH
7.0-7.2；
所述固態發酵培養基質量比例組成為：豆粕：麩皮：玉米粉＝10:10:0.5，水份含量控制
在60％，115℃高壓滅菌25min。
8.權利要求1-5任一所述凝結芽孢桿菌益生菌制劑在飼料中的應用，添加量為50-150克/噸。