本發明提供了一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，將食用菌菌絲或子實體，在外加電磁場輔助下進行種子液培養，然后將種子液菌體進行固定化并使其帶有磁性，將固定化的菌體，在高壓脈沖電場的輔助下進行深層發酵。通過本發明所得到的食用菌活性物質具有以下優點：食用菌有效成分提取充分，生產周期大大減少。固定化菌體可進行多次發酵，磁性固定化菌體有利于產物的分離和純化，降低下游技術的負擔；改善了普通工藝提取食用菌活性物質存在的周期長、有效成分利用率低、染菌多等問題，為后續多元化生產提供技術基礎。

1.一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于,包括以下步驟：
A1：取食用菌菌絲或子實體，洗凈，干燥至水分含量為6~8%后，將其粉碎至100~120目獲
得粉末，將粉末與水按料液比1：（40~60）混合均勻，滅菌后得到種子料；
A2：取將A1所得種子料在無菌條件下按15~20%的接種量接種至滅菌后的種子液培養基
中，然后置于搖床上并通入電磁場培養24~96小時，培養溫度23~25℃，得種子液；
A3：將A2所得種子液離心獲得的沉淀物，在無菌條件下與磁性海藻酸鈉溶液混合均勻
得到混合液；將混合液通過注射器滴入氯化鈣溶液進行固化20~30min，得到磁性載菌體海
藻酸鈣凝珠；將磁性海藻酸鈣凝珠用蒸餾水洗滌2~3次，然后與滅菌后的壁材溶液在無菌條
件下混合，200~230rpm轉速下振蕩15~30min進行成膜反應，得到磁性載菌體微膠囊；
所述的磁性海藻酸鈉溶液，是將磁性材料加入到20~25mg/ml海藻酸鈉溶液中混合均勻
制備而得；所述壁材溶液濃度為0.8~1.2mg/ml；所述的氯化鈣溶液濃度為18~22mg/ml；所述
混合液與氯化鈣溶液體積比為1：（1.5~2）；所述磁性海藻酸鈣凝珠與壁材溶液體積比為1：
（5~10）；
A4：將深層發酵培養基按發酵罐體積的60~80%加入發酵罐中，攪拌均勻后，將發酵罐封
好進行滅菌；待深層發酵培養基冷卻后，將F3所得磁性載菌體微膠囊按接種量為10~12%接
種至深層發酵培養基中得到深層發酵液；調節深層發酵液pH為5.2~6.2，控制深層發酵溫度
為22~25℃，無菌空氣通氣量為2.0~2.2m³/min，攪拌速度50~100r/min，罐壓38~45kPa，并通
入高壓脈沖電場進行深層發酵，發酵72~168小時后，排出深層發酵醪液；
所述深層發酵培養基含有以下重量百分比的組分：碳源3~5%、氮源0.15~0.3%、大豆分
離蛋白3~5%、礦物質鹽0.6~0.9%、促進劑1~1.8%、生長因子2~4%、組合氨基酸Ⅰ0.5~0.7%；所
述的組合氨基酸Ⅰ為谷氨酸與甘氨酸1:1組合；
所述碳源為葡萄糖、蔗糖、果糖、麥芽糖、玉米粉、山芋粉、豆粕、可溶性淀粉中的一種或
一種以上組合；
所述氮源為蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、酵母膏、黃豆餅粉、玉米粉、硫酸銨、硝酸鉀中一種
或一種以上組合；
所述的礦物質鹽為硫酸亞鐵、氯化鈉、硫酸鎂、氯化鉀、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、硫酸
鋅、氯化鋅中的一種或一種以上組合；
所述促進劑為橄欖油、中藥提取物、茶葉提取物、垂盆草、板藍根中的一種或一種以上
組合；
所述生長因子為蜂花粉、玉米粉、山茶油、枸杞粉中一種或一種以上組合；
A5：將A4所得發酵醪液，過濾后，即可得到含有食用菌活性物質的溶液。
2.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
A1所用食用菌為銀耳、靈芝、冬蟲夏草、香菇、松乳菇、猴頭菇、金針菇、茯苓中一種。
3.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
A1所述種子液培養基pH為5~7，含有以下重量分數比的組分：葡萄糖30~40份、蛋白胨15~25
份，促進劑0.1~0.3份，KH₂PO₄0.8~1.2份，MgSO₄?7H₂O0.5~1份，組合氨基酸Ⅱ0.9~1.1份；所
述促進劑為酵母粉、VB₂、VB₆、橄欖油、茶葉提取物、蠶蛹粉中一種或一種以上組合；所述組合
氨基酸Ⅱ為先加入谷氨酸和甘氨酸1:1組合0.5~0.6份，再加入甘氨酸和絲氨酸1:1組合0.4
~0.5份。
4.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
A1所述電磁場強度為10~20mT，作用時間5~20min/h。
5.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
A3所述的磁性材料為分析純等級的四氧化三鐵，在磁性海藻酸鈉溶液中含量為0.004~
0.006g/ml。
6.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
F3所述壁材溶液制備方法如下：取分子量4~6萬的殼聚糖溶于體積比為1%醋酸溶液中。
7.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
所述磁性載菌體微膠囊的制備，制得的磁性載菌體微膠囊直徑為300~450μm。
8.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
A4所述的高壓脈沖電場設置于發酵罐體中，電場頻率為40~60Hz，脈寬20~60μs，電場強度20
~50v/m，電場作用時間為20~40min。
9.根據權利要求1所述的一種連續深層發酵提取食用菌活性物質的方法，其特征在于：
A4排出發酵醪液的方法為利用可調節電磁場將磁性載菌體微膠囊定向吸引至發酵罐罐壁
上，菌液分離后，排出發酵醪液；可調節電磁場設置于發酵罐外壁，磁場強度50~100mT，作用
時間20~30min。