1.一種用于非診斷目的的在至少一種能夠與單鏈DNA結合的重組酶的存在下檢測樣品中靶核酸序列的方法，包括使所述樣品與至少一種包含熒光團、猝滅劑和與所述靶核酸序列互補的區域的寡核苷酸探針接觸，其中所述寡核苷酸探針的序列包含至少20％的RNA核苷酸、經修飾的RNA核苷酸和/或PNA核苷酸；另外其中所述寡核苷酸探針是單鏈的；其中所述方法包括擴增所述靶核酸序列，包括使所述樣品與(1)至少一種上游引物和至少一種下游引物以及(2)鏈侵入寡核苷酸接觸，所述上游引物和下游引物均包含與所述靶核酸序列互補的區域，所述鏈侵入寡核苷酸具有不可延伸的3’末端且包含與所述靶核酸序列互補的區域；其中所述重組酶用于所述靶核酸序列的鏈侵入。2.權利要求1的方法，其中所述擴增在等溫條件下進行。3.權利要求1或2的方法，其中所述寡核苷酸探針能夠引發所述靶核酸序列的擴增并且作為所述至少一種上游引物或下游引物而發揮作用。4.權利要求1的方法，其中所述重組酶選自UvsX或RecA。5.權利要求1的方法，其還包括存在重組酶輔助蛋白，任選地其中所述重組酶輔助蛋白選自UvsY或gp32。6.權利要求1或2的方法，其中所述寡核苷酸探針中存在的經修飾的RNA核苷酸包括至少一種2’-氟核糖核苷酸、2’-O-甲基核糖核苷酸或LNA核糖核苷酸。7.權利要求1或2的方法，其包括使所述樣品與RNase H接觸。8.權利要求1或2的方法，其中所述寡核苷酸探針的序列包含至少20％的經修飾的RNA核苷酸和/或PNA核苷酸，或包含20％至60％的RNA核苷酸。9.權利要求1或2的方法，其中所述寡核苷酸探針包含SEQ ID NO:24、25或30或其任一種的變體的序列。10.一種試劑盒，其包括單鏈寡核苷酸探針，所述單鏈寡核苷酸探針包含熒光劑、猝滅劑和與靶核酸序列互補的區域，其中所述寡核苷酸探針的序列包含至少20％的RNA核苷酸、經修飾的RNA核苷酸和/或PNA核苷酸，所述試劑盒還包括至少一種能夠與單鏈DNA結合的重組酶，用于所述靶核酸序列的鏈侵入；其中所述試劑盒包括含有與所述靶核酸序列互補的區域的上游引物和/或下游引物，以及具有不可延伸的3’末端且包含與所述靶核酸序列互補的區域的鏈侵入寡核苷酸，用于擴增所述靶核酸序列。11.權利要求10的試劑盒，其中所述寡核苷酸探針的序列包含至少20％的經修飾的RNA核苷酸和/或PNA核苷酸，或包含20％至60％的RNA核苷酸。12.權利要求10或11的試劑盒，其中所述單鏈寡核苷酸探針能夠引發所述靶核酸序列的擴增并且作為所述上游引物或所述下游引物而發揮作用。13.一種寡核苷酸探針用于制備在受試者中檢測疾病的試劑的用途，其中所述寡核苷酸探針包含熒光團、猝滅劑和與靶核酸序列互補的區域，其中所述靶核酸序列與所述疾病相關，且所述寡核苷酸探針的序列包含至少20％的RNA核苷酸、經修飾的RNA核苷酸和/或PNA核苷酸，且所述檢測包括使所述探針與來自受試者的樣品在以下物質存在下接觸：至少一種能夠與單鏈DNA結合的重組酶，其用于所述靶核酸序列的鏈侵入；以及至少一種上游引物和至少一種下游引物，其各自包含與所述靶核酸序列互補的區域；其中所述重組酶和至少一種上游引物和至少一種下游引物用于擴增所述靶核酸序列。14.權利要求13的用途，其中所述寡核苷酸探針的序列包含至少20％的經修飾的RNA核苷酸和/或PNA核苷酸，或包含20％至60％的RNA核苷酸。
展開
