本發明公開了N,N?二(2?羥乙基)芘甲酰胺及其合成方法和應用。N,N?二(2?羥乙基)芘甲酰胺，其結構式為：同時公開了N,N?二(2?羥乙基)芘甲酰胺的合成方法以及一種利用N,N?二(2?羥乙基)芘甲酰胺測定pH值的方法。也公開了所述的N,N?二(2?羥乙基)芘甲酰胺作為pH熒光探針的應用。本發明的N,N?二(2?羥乙基)芘甲酰胺作為熒光探針，可以在強酸性溶液中特異性檢測pH值，水溶性好，靈敏度高，選擇性強，具有一定的實際應用價值，是一種新型的強酸性pH水溶性熒光探針。

1.一種測定pH值的方法，其特征在于：步驟為：
1)制作標準曲線Ι：將N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺加入不同pH值的緩沖溶液中，配制成
相同濃度的N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺溶液，記錄各溶液的熒光強度，確定pH值與404nm處
熒光強度的定量關系；
2)制作標準曲線Ⅱ：將N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺加入不同pH值的緩沖溶液中，配制
成相同濃度的N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺溶液，記錄各溶液的熒光強度，確定pH值與484nm
處熒光強度的定量關系；
3)制作標準曲線Ⅲ：將N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺加入不同pH值的緩沖溶液中，配制
成相同濃度的N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺溶液，記錄各溶液的熒光強度，確定pH值與484nm
和404nm處熒光強度的比值I₄₈₄/I ₄₀₄的定量關系；
4)檢測記錄：將N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺加入待測溶液中，配制成相同濃度的N,N-
二(2-羥乙基)芘甲酰胺溶液，記錄溶液的熒光強度；
5)計算：根據定量關系計算待測溶液的pH值；
所述N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺的結構式為：

該測定pH值的方法不包括疾病的診斷或治療方法。
2.根據權利要求1所述的一種測定pH值的方法，其特征在于：步驟1)中，在激發波長為
350nm，測定N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺溶液在發射波長為404nm處的熒光強度與pH值變化
的定量關系。
3.根據權利要求1所述的一種測定pH值的方法，其特征在于：步驟2)中，在激發波長為
350nm，測定N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺溶液在發射波長為484nm處的熒光強度與pH值變化
的定量關系。
4.根據權利要求1所述的一種測定pH值的方法，其特征在于：步驟3)中，在激發波長為
350nm，記錄發射波長為404nm和484nm處的熒光強度，分別測定N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺
溶液熒光強度的比值I₄₈₄/I ₄₀₄與pH值變化的定量關系。
5.根據權利要求1所述的一種測定pH值的方法，其特征在于：所述N,N-二(2-羥乙基)芘
甲酰胺的合成方法，包括以下步驟：
1)將芘甲醛與KMnO₄于有機溶劑中混合，加熱至75～85℃反應3～4h，反應完成后，冷卻
過濾，調節濾液的pH為8.5，分液，取水相溶液，調節水相溶液的pH值為2.0，過濾得到沉淀，
干燥沉淀后得到芘甲酸；
2)將芘甲酸溶解于SOCl₂中，加熱至68～72℃回流2～3h，反應完成后，旋干溶劑，干燥，
得到芘甲酰氯，將芘甲酰氯溶解到有機溶劑中，再加入二乙醇胺，室溫攪拌反應2～3h，停止
反應后，水洗，分液，將有機層旋干并干燥，將得到的粗產物進行柱層析分離提純，得到N,N-
二(2-羥乙基)芘甲酰胺；
合成方法的步驟1)中，芘甲醛與KMnO₄的質量比為1:(2.2～2.5)；合成方法的步驟2)中，
芘甲酸與SOCl₂的用量比為1g:(4～6)mL；芘甲酸與二乙醇胺的質量比為1:(1.3～1.7)。
6.N,N-二(2-羥乙基)芘甲酰胺在制備pH熒光探針中的應用。