1.一種生物檢測脂肪酸濃度的方法,其特征在于包括以下步驟:
A)構建共表達由啟動子PFadD驅動的RFP基因和外源啟動子PFabB驅動的GFP基因的重組工
程大腸桿菌菌株;所述的重組工程大腸桿菌菌株是將共表達質粒pSB1C3 R+G轉化到大腸桿
菌DH5α所得;所述的共表達質粒pSB1C3 R+G是以pSB1C3為出發載體,在Xba I/Spe I酶切位
點間依次插入啟動子PFadD、RFP基因、啟動子PFabB及GFP基因所得;
B)將待檢測樣品加入所述的重組工程大腸桿菌發酵液中發酵培養,檢測紅色熒光和綠
色熒光強度;
C)根據紅色熒光和綠色熒光的強度確定樣品脂肪酸濃度。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于所述啟動子PFadD來源于大腸桿菌,序列如SEQ
ID NO.1所示;所述啟動子PFabB來源于大腸桿菌,序列如SEQ ID NO.2所示。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于步驟B)是將所述的重組工程大腸桿菌在30-
37℃、400-800rpm、pH 6.5-7.5和溶氧20%以上的條件下培養至OD600為12-20,加入待檢測
樣品,發酵2-4小時后檢測紅色熒光和綠色熒光強度。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于在激發光波長501nm,發射光波長511nm檢測
綠色熒光;在激發光波長584nm,發射光波長607nm檢測紅色熒光。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于所述的方法還包括構建紅色熒光強度、綠色
熒光強度與脂肪酸濃度的標準曲線;將待檢測樣品的紅色熒光強度、綠色熒光強度帶入標
準熒光曲線,得出待檢測樣品所含的脂肪酸濃度。
6.一種用于檢測脂肪酸含量的PFadD-RFP和PFabB-GFP共表達質粒,其特征在于所述的共
表達質粒是以pSB1C3為出發載體,在Xba I /Spe I酶切位點間依次插入啟動子PFadD、RFP基
因、啟動子PFabB及GFP基因所得。
7.一種用于檢測脂肪酸含量的基因工程菌,其特征在于由權利要求6所述的共表達質
粒轉染大腸桿菌所得。
8.權利要求6所述的共表達質粒、權利要求7所述的基因工程菌在檢測脂肪酸濃度中的
應用。
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