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一種受滲透壓調(diào)控的啟動(dòng)子及其應(yīng)用

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-14
  • 技術(shù)成熟度:詳情咨詢
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201510875053.2 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種受滲透壓調(diào)控的啟動(dòng)子及其應(yīng)用 
  • 項(xiàng)目單位 中國科學(xué)院南海海洋研究所
  • 發(fā)明人 趙哲,胡超群,任春華,江曉,鄧益琴 
  • 行業(yè)類別 智慧健康-其他
  • 技術(shù)成熟度 詳情咨詢
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 周金梅
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-12-14  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    本發(fā)明一種受滲透壓調(diào)控的啟動(dòng)子P、其重組表達(dá)載體及應(yīng)用,屬于基因工程領(lǐng)域。所述啟動(dòng)子P序列如SEQ ID NO.1所示,來源于大腸桿菌SSuT?25菌株;該啟動(dòng)子在體外能與滲透壓調(diào)節(jié)蛋白OmpR相結(jié)合,擁有至少3個(gè)潛在的OmpR結(jié)合位點(diǎn)。本發(fā)明還提供了含有該啟動(dòng)子以及GFP基因的重組表達(dá)載體,將該重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到大腸桿菌基因工程TOP10菌株中,在M9培養(yǎng)基中能誘導(dǎo)GFP基因的表達(dá)。本發(fā)明的啟動(dòng)子具有可以不依賴于IPTG等化學(xué)試劑誘導(dǎo)實(shí)現(xiàn)外源基因在大腸桿菌表達(dá)體系中高效表達(dá),成本低,對表達(dá)產(chǎn)物不產(chǎn)影響;有利于表達(dá)產(chǎn)物尤其是分泌性表達(dá)蛋白的后續(xù)純化和活性分析的優(yōu)點(diǎn)。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種受滲透壓調(diào)控的啟動(dòng)子PmccPDI,其特征在于:所述啟動(dòng)子PmccPDI來源于大腸桿菌
    SSuT-25菌株,其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。
    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種受滲透壓調(diào)控的啟動(dòng)子PmccPDI,其特征在于:所述啟動(dòng)子
    PmccPDI在體外能與滲透壓調(diào)節(jié)蛋白OmpR相結(jié)合,擁有至少3個(gè)潛在的OmpR結(jié)合位點(diǎn)。
    3.一種重組表達(dá)載體,其特征在于,所述重組表達(dá)載體包含權(quán)利要求1或2所述的受滲
    透壓調(diào)控的啟動(dòng)子PmccPDI;在重組表達(dá)載體中,啟動(dòng)子PmccPDI連接于外源基因序列的上游。
    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組表達(dá)載體,其特征在于,所述的外源基因?yàn)榫G色熒光蛋白
    基因或其他待表達(dá)外源基因。
    5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的重組表達(dá)載體,其特征在于:所述重組表達(dá)載體為pCR2.1-
    PmccPDI-GFP。
    6.權(quán)利要求1或2所述的受滲透壓調(diào)控的啟動(dòng)子PmccPDI在驅(qū)動(dòng)外源基因表達(dá)中的應(yīng)用。
    7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于:所述外源基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。
    8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用,其特征在于:將包含權(quán)利要求1或2所述的受滲透壓調(diào)控
    的啟動(dòng)子PmccPDI的重組表達(dá)載體pCR2.1-PmccPDI-GFP轉(zhuǎn)化到大腸桿菌基因工程TOP10菌株中,
    在M9培養(yǎng)基中誘導(dǎo)GFP基因的表達(dá),表明低滲透壓誘導(dǎo)條件下啟動(dòng)子PmccPDI能驅(qū)動(dòng)目標(biāo)基因
    在大腸桿菌體系中的高效表達(dá)。
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