放射線劑量的生物檢測用報告質(zhì)粒及其制備方法，以抗輻射菌-大腸桿菌間的穿梭載體為基礎(chǔ)，與具有北美產(chǎn)螢火蟲的寄主DNA由來的熒光素酶基因lux領(lǐng)域的DNA片段重組，構(gòu)建成具有熒光素酶基因活性的抗輻射菌-大腸桿菌間的穿梭載體的報告質(zhì)粒。將報告質(zhì)粒轉(zhuǎn)化抗輻射菌的野生型R1中，獲轉(zhuǎn)化體抗輻射菌，供γ-射線照射。將轉(zhuǎn)化體抗輻射菌培養(yǎng)到穩(wěn)定期，用γ-射線照射后再培養(yǎng)，以性狀轉(zhuǎn)化體的發(fā)光量為依據(jù)，測定不同劑量γ-射線照射后的不同發(fā)光量。研究結(jié)果，在使用的0-2000Gy的劑量范圍內(nèi)，不同劑量γ-射線照射后菌體的發(fā)光量與照射劑量之間的相關(guān)系數(shù)為0.892，達極顯著水平。

1.放射線劑量的生物檢測用報告質(zhì)粒，其特征在于：以抗輻射菌-大腸桿菌間的穿梭載體為基礎(chǔ)，與具有北美產(chǎn)螢火蟲(Photinus?pyralis)的寄主DNA由來的熒光素酶基因luc領(lǐng)域的DNA片段重組，構(gòu)建成具有熒光素酶基因活性的抗輻射菌-大腸桿菌間的穿梭載體的報告質(zhì)粒；穿梭載體質(zhì)粒的構(gòu)建為：用QIAfilter?Plasmid?kit從抗輻射菌Deinococcus?radiopugnans中提取質(zhì)粒pUE30并進行SphI酶切，用SphI分別消化包含有大腸桿菌載體pUC19復(fù)制開始領(lǐng)域、大腸桿菌中有活性的Amp抗性基因、抗輻射菌Deinococcus?radiodurans中有活性的氯霉素抗性基因的質(zhì)粒pKatCAT，再與上述pUE30的SphI消化物混合，用DNA連接酶連接，采用電穿孔法將上述連接物轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109株，從抗Amp的轉(zhuǎn)化株中選擇具有pUE30和pKatCAT連接的質(zhì)粒的株，獲得穿梭載體質(zhì)粒；報告質(zhì)粒的構(gòu)建為：在上述穿梭載體質(zhì)粒的Nde?I酶切位點插入熒光蛋白酶基因Luc+，構(gòu)建成質(zhì)粒；設(shè)計包含限制性內(nèi)切酶Nde?I位點的DNA損傷修復(fù)基因rec?A的啟動子的引物，PCR增幅DNA損傷修復(fù)基因rec?A的啟動子，將上述PCR產(chǎn)物順向插入上述質(zhì)粒的熒光蛋白基因Luc+上游的Nde?I部位，由此形成測定用的報告質(zhì)粒。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述放射線劑量的生物檢測用報告質(zhì)粒，其特征在于：所述DNA損傷修復(fù)基因rec?A的啟動子的引物序列為：SEQ?ID?NO?1：ttgtcagctt?cggtcagttg?acatSEQ?ID?NO?2：tggggtcctc?ctgtgagtga。