1.一種葡萄白粉病菌的單孢分離方法,包括下述步驟:
1)取兩個培養皿疊放在一起,用打孔器在上面培養皿的皿底和下面培養皿的皿蓋上同一
位置打孔,在下面的培養皿中加入滅菌的超純水得到雙層培養皿裝置;
2)用細毛刷刷掉葡萄白粉病葉上白粉病菌產生的分生孢子,然后將葉片放入步驟1)中
疊放的雙層培養皿裝置中,其中葉片葉面向上置于雙層培養皿裝置的上層培養皿中,葉柄從
預先打好的孔插入下層培養皿,同時保證葉柄浸入超純水中;
3)把步驟2)中放入葉片的雙層培養皿裝置于22℃,光照周期為10-14小時/天的培養
箱中培養10-14天;
4)選取對葡萄白粉病菌敏感的葡萄品種的葡萄藤上自上而下第2-4片幼嫩葉片,將采集
的葉片首先進行解剖鏡鏡檢,確保葉面無白粉菌落或菌絲后,進行消毒處理;將消毒處理后
的葡萄葉片置于按照步驟1)的方法獲得的雙層培養皿裝置中,葉片葉面向上置于雙層培養
皿裝置的上層培養皿中,葉柄從預先打好的孔插入下層培養皿,同時保證葉柄浸入超純水中;
5)在解剖鏡下用針將經步驟3)培養過的白粉病葉上新產生的單個或單串分生孢子轉移
到步驟4)的葡萄葉片上,用記號筆標記出葉片上的接種點;然后按照步驟3)所述方法培養,
在記號筆標記部位形成的菌落即為葡萄白粉病菌分離單孢的純培養。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟4)中,所述葉片表面消毒處理的方法
為質量百分濃度為1%的次氯酸鈉處理1min,再用滅菌的超純水清洗,然后用滅菌的濾紙吸干
葉片表面的水分。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟4)中,所述對葡萄白粉病菌敏感的葡
萄品種為夏黑葡萄品種。
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