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一種樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法及所用培養(yǎng)基

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-11-29
  • 技術(shù)成熟度:通過小試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201610618080.6 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法及所用培養(yǎng)基 
  • 項(xiàng)目單位 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院麻類研究所
  • 發(fā)明人 李智敏,嚴(yán)準(zhǔn),嚴(yán)理,高春生,余永廷,曾糧斌,陳佳,程毅,孫向平,薛召東 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)藥制造-原料藥
  • 技術(shù)成熟度 通過小試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 沈凱
  • 發(fā)布時間 2021-11-29  
  • 01

    項(xiàng)目簡介

    本發(fā)明涉及一種樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法及所用培養(yǎng)基,將樣品涂布于分離培養(yǎng)基上培養(yǎng),分離培養(yǎng)基成分中不含任何氮源,按質(zhì)量百分比含:0.4%?1%碳源、1.5?2%瓊脂粉,0.15?0.3%KHPO,0.1?0.3%MgSO,0.1?0.3%CaCl,0.3?0.5%CaCO,pH 6.5?7;該培養(yǎng)基中還含有能抑制細(xì)菌而不抑制真菌的抗生素;碳源為蔗糖、葡萄糖、D?半乳糖、阿拉伯糖和甘露醇中的一種或幾種;培養(yǎng)好后從單菌落上挑取白色半透明氣生菌絲,顯微觀察根據(jù)細(xì)胞形態(tài)特征判斷是否為鐮刀菌。本發(fā)明可實(shí)現(xiàn)對各類樣品中的鐮刀菌的檢測,避免其他真菌污染,使得檢測靈敏度更高、周期更短。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法,其特征在于包括:
    將樣品涂布于分離培養(yǎng)基上培養(yǎng),所述分離培養(yǎng)基成分中不含任何氮源,按質(zhì)量百分
    比含:0.4%-1%碳源, 1.5-2%瓊脂粉,0.15-0.3% K2HPO4,0.1-0.3% MgSO4,0.1-0.3% CaCl2
    0.3-0.5% CaCO3,pH 6.5-7;該培養(yǎng)基中還含有能抑制細(xì)菌而不抑制真菌的抗生素;所述碳
    源為蔗糖、葡萄糖、D-半乳糖、阿拉伯糖和甘露醇中的一種或幾種;
    培養(yǎng)好后從單菌落上挑取白色半透明氣生菌絲,顯微觀察根據(jù)細(xì)胞形態(tài)特征判斷是否
    為鐮刀菌;
    所述能抑制細(xì)菌而不抑制真菌的抗生素為鏈霉素和/或頭孢霉素。
    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法,其特征在于所述樣品取
    自玉米種、玉米須或茭白。
    3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法,其特征在于平皿中的
    分離培養(yǎng)基厚度不小于4毫米;平皿不需密封,保持透氣。
    4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法,其特征在于所述培養(yǎng)
    是置于恒溫培養(yǎng)箱中,28~30℃培養(yǎng)2~3天。
    5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法,其特征在于在載玻片上
    滴上含有15-30%甘油的水滴,將挑取的白色半透明氣生菌絲分散于水滴中,用顯微鏡觀察,
    憑經(jīng)驗(yàn)或軟件判定是否鐮刀菌。
    6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法,其特征在于通過真菌
    分子鑒定方法進(jìn)一步確定鐮刀菌的種屬。
    7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的樣品中鐮刀菌的快速分離檢測方法,其特征在于挑取白色半
    透明氣生菌絲接種于真菌液體培養(yǎng)基進(jìn)一步培養(yǎng)后,進(jìn)行ITS序列擴(kuò)增測序。
    8.一種用于樣品中鐮刀菌的快速分離檢測的培養(yǎng)基,其特征在于培養(yǎng)基成分中不含任
    何氮源,按質(zhì)量百分比含:0.4%-1%碳源, 1.5-2%瓊脂粉,0.15-0.3% K2HPO4,0.1-0.3%
    MgSO4,0.1-0.3% CaCl2,0.3-0.5% CaCO3,pH 6.5-7;所述碳源為蔗糖、葡萄糖、D-半乳糖、阿
    拉伯糖和甘露醇中的一種或幾種;
    該培養(yǎng)基中還含有能抑制細(xì)菌而不抑制真菌的抗生素。
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專利技術(shù)附圖

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