1.一種提高新霉素產量的生產方法,其包括如下步驟:
(1)斜面培養制得斜面孢子:將弗氏鏈霉菌Streptomycesfradiae接種至
斜面培養基內,接后于28℃的恒溫室培養10~12天,得斜面孢子,其
中,所述的斜面培養基按g/100ml計為:葡萄糖1.0、牛肉膏0.2、
瓊脂1.8~2.2、磷酸氫二鉀0.05和DL-天冬素0.05;
(2)制備斜面孢子懸浮液:選步驟(1)中生長正常且符合質量要求的斜面孢子,
在無菌條件下,加無菌水制成孢子懸液,置0-4℃條件下保存,保存時間為
8hr內,得待接種用斜面孢子懸浮液;
(3)繁殖罐培養制備新霉素繁殖培養物:將步驟(2)制得的斜面孢子
懸浮液置于繁殖罐中進行擴大培養,種子接入量為擴大培養基體
積的2%,培養溫度為36℃,培養時間為42小時,得到新霉素繁
殖培養物,其中,繁殖罐培養所用的培養基為:按g/100ml計,
花生餅粉1.0、玉米淀粉1.0、酵母粉2.25、葡萄糖2.5、蛋白胨
0.5、硫酸銨0.1、輕質碳酸鈣1.4、Na2HPO40.1、豆油0.28;
(4)發酵罐發酵培養制備新霉素發酵產物:將步驟(3)所制得的新霉
素繁殖培養物置于發酵罐中進行發酵培養,種子接入量為發酵培
養基體積的15~20%,發酵溫度為35℃,發酵時間為130小時,
得到新霉素發酵產物,其中,發酵罐培養所用的培養基為:按
g/100ml計,黃豆餅粉0.5、花生餅粉2.8、大米粉5.0、酵母粉
0.9、葡萄糖1.5、蛋白胨1.0、硫酸銨0.5、氯化鈉0.45、
輕質碳酸鈣0.45、KH2PO40.06、α-淀粉酶0.02、豆油0.12、
硅油0.05,并加入添加劑,按培養基的體積計,所述添加劑選
自如下的一種以上:賴氨酸0.05-0.5克/升,乳酸亞鐵0.05-0.5
克/升,蛋氨酸0.3-1.0克/升,酪氨酸0.01-0.3克/升,維生素B12
0.02-0.45毫克/升,水解酪素0.5-50克/升,果糖0.5-25克/升,
氨基葡萄糖0.5-25克/升,葉酸0.01-0.2毫克/升,核黃素0.02-0.45
毫克/升,色氨酸0.1-0.3克/升;
(5)將步驟(4)所得到的新霉素發酵產物經分離和純化處理制得新
霉素。
2.根據權利要求1所述的生產方法,其中在步驟(2)中,通過種子培
養考察斜面孢子質量,每只種瓶接種量為3-4cm2斜面孢子,每只種瓶中
培養基為80ml,于轉速為220-240rpm的搖瓶機上,在溫度為35℃的條
件下培養6天,得種子發酵液考察斜面孢子質量,其中種子培養所用的
培養基按g/100ml計為:葡萄糖2.0、DL-天冬素0.06、蛋白胨0.5、花生餅粉2.8、
酵母粉0.5、大米粉8.0、玉米漿0.25、淀粉酶0.0025、硫酸銨0.6、輕質碳酸鈣
0.45。
3.根據權利要求1或2所述的生產方法,其中所述的分離和純化處理制
得新霉素的過程包括如下步驟:(1)將得到的新霉素發酵產物進行酸化
處理至pH值為6-7,得到新霉素酸化液;(2)將得到的新霉素酸化液以
732型樹脂進行吸附和解吸處理,得到新霉素解析液;(3)將得到的新霉
素解析液以711型樹脂進行脫色,得到新霉素脫色液;(4)將得到的新
霉素脫色液進行薄膜濃縮,制得新霉素濃縮液。
4.根據權利要求3所述的生產方法,其中還包括如下步驟:(1)將制得
的新霉素濃縮液加入硫酸成鹽后制得硫酸新霉素成品液;(2)將制得的
硫酸新霉素成品液通過噴霧干燥制得硫酸新霉素成品。
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