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產表柔紅霉素的天藍淡紅鏈霉菌基因工程菌及其制備方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2022-01-08
  • 技術成熟度:詳情咨詢
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN200910051619.4 
  • 技術(專利)名稱 產表柔紅霉素的天藍淡紅鏈霉菌基因工程菌及其制備方法 
  • 項目單位 上海醫藥工業研究院
  • 發明人 邵雷,黃佳,李繼安,陳代杰,景蘭 
  • 行業類別 醫藥制造-衛生用品
  • 技術成熟度 詳情咨詢
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 孫劍靈
  • 發布時間 2022-01-08  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種高產表柔紅霉素的天藍淡紅鏈霉菌的基因工程菌,其是一種在天藍淡紅鏈霉菌野生菌株的dnmV基因中插入或者置換為包含aveBIV基因的第一外源基因,使dnmV基因被阻斷而表達aveBIV(阿維菌素酮基還原酶)的基因工程菌,其特征在于,該基因工程菌的基因組中還整合著第二外源基因,所述的第一外源基因和第二外源基因都是啟動子和aveBIV基因的連鎖片段。本發明所構建的基因工程菌,不含有任何抗性標記,很方便用于進一步的基因工程改造;表柔紅霉素產量遠遠大于已有方法,最好可達70mg/L;通過連續傳代,表柔紅霉素產量非常穩定,重復性好。
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  • 02

    說明書

    1.一種生產表柔紅霉素的天藍淡紅鏈霉菌的基因工程菌,其是一種將
    天藍淡紅鏈霉菌野生菌株的dnmV基因置換為包含aveBIV基因的第一外源
    基因,使dnmV基因被阻斷而表達aveBIV的基因工程菌,其特征在于,該
    基因工程菌的基因組中還整合著第二外源基因,所述的第一外源基因和第二
    外源基因都是啟動子和aveBIV基因的連鎖片段;所述的啟動子的核苷酸序
    列是序列表中SEQ?ID?NO.1的第1525~2198位所示的核苷酸序列,所述的
    aveBIV基因的核苷酸序列是如序列表中SEQ?ID?NO.1的第2199~3492位所
    示;所述的天藍淡紅鏈霉菌野生菌株的dnmV基因的第273位~675位之間的
    核苷酸片段被所述的第一外源基因置換掉;所述的天藍淡紅鏈霉菌野生菌株
    是天藍淡紅鏈霉菌(Streptomyces?coeruleorubidus)SIPI-1482。
    2.如權利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述的第二外源基
    因在基因組中的整合位置是在基因組的任何位置。
    3.一種重組載體,其含有啟動子和aveBIV基因的連鎖片段,所述的重
    組載體的載體骨架是質粒pSET152,所述的啟動子和aveBIV基因的連鎖片
    段的核苷酸序列如序列表中SEQ?ID?NO.1第1525~3492位所示。
    4.一種轉化子,其特征在于,其含有權利要求3所述的重組載體。
    5.如權利要求4所述的轉化子,其特征在于,所述的轉化子的宿主細
    胞是大腸桿菌ET12567。
    6.一種制備生產表柔紅霉素的天藍淡紅鏈霉菌的基因工程菌的方法,
    其特征在于,包括將如權利要求4所述的轉化子與產表柔紅霉素的天藍淡紅
    鏈霉菌接合,挑選接合子。
    7.一種制備表柔紅霉素的的方法,其特征在于,包括培養如權利要求1
    或2所述的天藍淡紅鏈霉菌的基因工程菌,從培養物中獲得表柔紅霉素。
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專利技術附圖

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