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一種稀磷酸結(jié)合汽爆預(yù)處理改進(jìn)木質(zhì)纖維酶解糖化的方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-21
  • 技術(shù)成熟度:通過(guò)中試
交易價(jià)格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實(shí)
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過(guò)戶
  • 交易成功

專利推薦

  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請(qǐng)?zhí)?專利號(hào) CN201410457462.6 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種稀磷酸結(jié)合汽爆預(yù)處理改進(jìn)木質(zhì)纖維酶解糖化的方法 
  • 項(xiàng)目單位 中南林業(yè)科技大學(xué)
  • 發(fā)明人 陳介南,張林,劉娜,王揮,詹鵬,喻傳明 
  • 行業(yè)類別 智慧健康-其他
  • 技術(shù)成熟度 通過(guò)中試
  • 交易價(jià)格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 許祥璐
  • 發(fā)布時(shí)間 2021-12-21  
  • 01

    項(xiàng)目簡(jiǎn)介

    本發(fā)明公開(kāi)了一種稀磷酸結(jié)合汽爆預(yù)處理改進(jìn)木質(zhì)纖維酶解糖化的方法,利用黑曲霉C112進(jìn)行液體發(fā)酵生產(chǎn)β?葡萄糖苷酶,在一定培養(yǎng)條件下,所得β?葡萄糖苷酶酶活力可達(dá)15.496IU/ml。將黑曲霉C112生產(chǎn)的β?葡萄糖苷酶與里氏木霉RUT C30生產(chǎn)的纖維素酶進(jìn)行酶系復(fù)合,制備出高活性復(fù)合纖維素酶,用于處理經(jīng)稀磷酸浸漬蒸汽爆破處理后的木質(zhì)纖維酶解糖化率可達(dá)到80%以上,同步糖化共發(fā)酵乙醇得率達(dá)到83.191%。
    展開(kāi)
  • 02

    說(shuō)明書(shū)

    1.一種稀磷酸結(jié)合汽爆預(yù)處理改進(jìn)木質(zhì)纖維酶解糖化的方法,其特征在于,風(fēng)干楊木
    屑,木屑直徑為1-2mm,長(zhǎng)度為2-15mm,1%磷酸按固液比1:2.5預(yù)浸漬1h,在蒸汽爆破壓強(qiáng)為
    2MPa,保壓時(shí)間180s,爆發(fā)速度:0.00875S條件下進(jìn)行爆破;測(cè)得含水率為80%,按絕干重的
    爆破物占發(fā)酵罐裝載量體積的10%裝入2.5L發(fā)酵罐中,裝量為1.5L,除開(kāi)加入的爆破物,檸
    檬酸緩沖液和氨水,KH2PO4,CaCl2·H2O,MgSO4·7H2O,酶外,余量為水,加入發(fā)酵罐裝載量體
    積30%的0.05mol/L的檸檬酸緩沖液,再用1mol/L氨水中和脫毒調(diào)節(jié)pH值至5.5±0.5,加入
    KH2PO4 0.5g/L,CaCl2·H2O 0.4g/L,MgSO4·7H2O 0.4g/L,以濾紙酶活FPU為20IU/g加入制
    備的混合酶液,50℃下酶解12h后,降溫至37℃,加入發(fā)酵菌種釀酒酵母和大腸桿菌KO11混
    合酶解發(fā)酵96h,細(xì)胞干重初始濃度分別為1g/L和0.33g/L;采用氣相色譜法測(cè)得乙醇濃度
    為30.585mg/ml,乙醇得率達(dá)到83.191%;
    所述的混合酶液的制備方法如下:分別將保藏編號(hào)為CCTCC NO:M2012129的黑曲霉
    C112生產(chǎn)的β-葡萄糖苷酶與保藏編號(hào)為ATCC 56765的里氏木霉RUT C30生產(chǎn)的纖維素酶濃
    縮提純,濃縮后的酶液混合使得β-葡萄糖苷酶活/濾紙酶活比值為1.536;黑曲霉C112通過(guò)
    產(chǎn)β-葡萄糖苷酶的培養(yǎng)基得到高活力的β-葡萄糖苷酶,培養(yǎng)基配方為:玉米芯25g/L,稻草
    粉30g/L,蛋白胨5g/L,(NH4)2SO4 10g/L,KH2PO4 6g/L,CaCl2·2H2O 0.9g/L,MgSO4·7H2O
    0.9g/L,吐溫-80 1ml/L,Mandels微量元素濃縮液1ml/L,1mol/L檸檬酸緩沖液100ml/L,加
    水配制成1L;
    黑曲霉C112的產(chǎn)β-葡萄糖苷酶的培養(yǎng)過(guò)程如下:將黑曲霉菌C112的種子培養(yǎng)液,以體
    積百分比5-8%的接種量接種于裝有40-60ml產(chǎn)酶培養(yǎng)基的250ml搖瓶中,26-28℃,180-
    220r/min條件下培養(yǎng)4-6天,離心,取上清液得到粗酶液。
    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的稀磷酸結(jié)合汽爆預(yù)處理改進(jìn)木質(zhì)纖維酶解糖化的方法,其特
    征在于,
    黑曲霉C112的種子培養(yǎng):從保存的黑曲霉C112土豆固體平板培養(yǎng)基中挑取孢子,接種
    于裝有40-60ml種子培養(yǎng)基的250ml搖瓶中,26-28℃,180-220r/min條件下培養(yǎng)2~3天作為
    接種物;黑曲霉C112種子培養(yǎng)基:馬鈴薯250~300g/L,葡萄糖15~25g/L,pH值6.5~7.0。
    3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的稀磷酸結(jié)合汽爆預(yù)處理改進(jìn)木質(zhì)纖維酶解糖化的方法,其特
    征在于,
    黑曲霉C112生產(chǎn)的纖維素酶β-葡萄糖苷酶活為13.368~15.496U/mL,濾紙酶活為
    0.183~0.215IU/mL,經(jīng)超濾濃縮儀濃縮后,β-葡萄糖苷酶活為18.793~24.741U/mL,濾紙
    酶活為0.785~0.932IU/mL;里氏木霉RUT C30生產(chǎn)的纖維素酶β-葡萄糖苷酶活為1.205~
    1.652U/mL,濾紙酶活為5.931~6.212IU/mL;經(jīng)超濾濃縮儀濃縮后,β-葡萄糖苷酶活為
    9.379~12.662U/mL,濾紙酶活為43.335~48.912IU/mL。
    展開(kāi)

專利技術(shù)附圖

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    專利證書(shū)

    專利利登記簿副本

安全保障

  • 品類齊全

    海量資源庫(kù),平臺(tái)整合幾十萬(wàn)閑置資源。
  • 交易保障

    完善的資金保障體系確保買(mǎi)賣(mài)雙方資金安全。
  • 專人跟進(jìn)

    專業(yè)交易顧問(wèn)全程服跟進(jìn),確保交易流暢。
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