本發明公開了用于生物酶固定化的順磁性的環氧基介孔分子篩及其制備方法，屬于生物技術領域。本發明先用γ-[(2，3)-環氧丙氧]丙基三甲氧基硅烷在介孔分子篩表面引入環氧基團，再以共價鍵分別將L-半胱氨酸表面修飾的粒徑大于介孔分子篩孔徑的順磁性FeO納米粒子和生物酶固定到介孔分子篩的外表面和內表面，來制備特殊結構的順磁性固定化酶，可以在外加磁場的作用下易于從液相體系中分離出來，從而提高固定化酶的性能和分離效率。上述順磁性的環氧基介孔分子篩可用于青霉素酰化酶、葡萄糖異構酶、葡萄糖轉苷酶、胰蛋白酶和淀粉酶等水溶性生物酶的固定化，制得的順磁性固定化青霉素酰化酶的活性為8800U/g，經過10次循環使用后保留了94.5％的初始活性。

1.一種用于生物酶固定化的順磁性的環氧基介孔分子篩的制備方法，其特征在于，該方
法先用γ-[(2，3)-環氧丙氧]丙基三甲氧基硅烷在介孔分子篩的內外表面引入環氧基官能團，然
后用共價結合方式將經過L-半胱氨酸表面修飾的粒徑大于介孔分子篩孔徑的順磁性Fe₃O₄納
米粒子嫁接在介孔分子篩的外表面和生物酶固定在介孔分子篩的內表面，來制備特殊結構的
順磁性固定化酶，具體操作步驟如下：
步驟一，在室溫條件下，將2.0g?Pluronic?P123(EO₂₀PO₇₀EO₂₀，M_av＝5800)溶于75mL
1.6mol/L的HCl溶液中；待P123完全溶解后加入0.023g氟化銨和3.0g1，3，5-三甲苯，然后
將溶液升溫至37℃并持續攪拌1小時后，加入4.4g正硅酸乙酯，并在37℃下持續攪拌20小
時；將溶液轉入帶有聚四氟乙烯內襯的水熱晶化釜中，于100℃水熱晶化24小時；待溶液冷
卻至室溫后過濾得到白色固體，在100℃的烘箱中干燥過夜，然后在馬弗爐中程序升溫至500℃
焙燒8小時得到介孔分子篩；
步驟二，將介孔分子篩和γ-[(2，3)-環氧丙氧]丙基三甲氧基硅烷加入甲苯溶液中，在
100～120℃加熱回流6～18小時，然后將介孔分子篩過濾用乙醇洗滌后，在60～120℃真空烘箱
中干燥6～18小時，得到環氧基介孔分子篩；
步驟三，將用共沉淀法合成的Fe₃O₄納米粒子分散于水中，用稀鹽酸調節溶液pH值為
4.0～5.0，然后加入L-半胱氨酸溶液，超聲反應15～45分鐘，用磁鐵磁分離除去水溶液，得到
L-半胱氨酸表面修飾的順磁性Fe₃O₄納米粒子；
步驟四，將L-半胱氨酸表面修飾的順磁性Fe₃O₄納米粒子的懸浮水溶液滴加到環氧基介
孔分子篩的懸浮水溶液中，常溫反應1～5小時后用磁鐵磁分離除去水溶液，然后在40～80℃
真空烘箱中干燥6～18小時，得到順磁性的環氧基介孔分子篩。
2.根據權利要求1所述的用于生物酶固定化的順磁性的環氧基介孔分子篩的制備方法，
其特征在于，所述的γ-[(2，3)-環氧丙氧]丙基三甲氧基硅烷和介孔分子篩的質量比為0.5～2∶1。
3.根據權利要求1所述的用于生物酶固定化的順磁性的環氧基介孔分子篩的制備方法，
其特征在于，所述的L-半胱氨酸和順磁性Fe₃O₄納米粒子的質量比為0.03～0.35∶1。
4.根據權利要求1所述的用于生物酶固定化的順磁性的環氧基介孔分子篩的制備方法，
其特征在于，所述的L-半胱氨酸表面修飾的順磁性Fe₃O₄納米粒子和環氧基介孔分子篩的質
量比為0.2～0.7∶1。