本發明提供了一種抗腫瘤注射制劑的檢測方法，所述抗腫瘤注射制劑是由中藥材人參、斑蝥、黃芪和刺五加制成，所述檢測方法包括性狀、鑒別、檢查、指紋圖譜、含量測定項目。其中，鑒別包括顯色反應以及對刺五加、人參、黃芪藥材的定量鑒別；檢查包括5?羥甲基糠醛、熾灼殘渣、溶液顏色等注射制劑的特殊檢查；指紋圖譜是采用HPLC法對人參、黃芪、刺五加所含活性成分的表征；含量測定是對產品中總皂苷、紫丁香苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷和斑蝥素的含量進行檢測。與現有技術相比，本發明增加了對刺五加藥材的鑒別、5?羥甲基糠醛等的特殊檢查、指紋圖譜表征，以及紫丁香苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測定，優化了人參、黃芪藥材的鑒別方法，以及斑蝥素的含量測定方法，提高了對產品質量檢測的要求，更加適合于今后藥品的質量控制，保障藥品質量和臨床藥效。

1.一種抗腫瘤注射制劑的檢測方法，所述注射制劑由斑蝥1-2份、人參30-70份、黃芪75-125份、刺五加130-180份制成注射液，所述檢測方法由性狀、鑒別、檢查、指紋圖譜、含量測定項目組成；所述鑒別方法為α-萘酚顯色反應，以異嗪皮啶為對照、以二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝30-50∶0.3-0.6∶0.3-0.6為展開劑、對制劑中刺五加藥材的薄層色譜鑒別，以及以人參皂苷Re、Rg1、Rb以及黃芪甲苷為對照、以三氯甲烷∶甲醇∶水∶甲酸＝10-20∶4-8∶0.5-2∶0.2-0.5為展開劑、對制劑中人參和黃芪藥材的薄層色譜鑒別；所述檢查為溶液的顏色、pH值檢查，以甲醇：0.4％冰醋酸＝2-8:92-98為流動相、對注射劑中5-羥甲基糠醛含量進行的HPLC法檢查，以及對注射液中熾灼殘渣、熱原、異常毒性、過敏反應、溶血與凝聚、其他注射劑項目的檢查；所述指紋圖譜是對制劑中人參、黃芪、刺五加藥材，以三氟醋酸的乙腈溶液為流動相A，以三氟醋酸的水溶液為流動相B，進行梯度洗脫的HPLC法指紋圖譜表征過程；所述含量測定是對制劑中人參總皂苷含量進行測定，采用人參皂苷Re對照品為對照的紫外-可見分光光度法；對刺五加中所含的紫丁香苷、黃芪中所含的毛蕊異黃酮葡萄糖苷進行含量測定，采用甲醇為流動相A、水為流動相B進行梯度洗脫的HPLC法；對斑蝥所含斑蝥素含量進行測定，采用以5％二苯基-95％二甲基聚硅氧烷為固定相的氣相-毛細管色譜法；其特征在于：具體的指紋圖譜表征方法如下：按照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以含0.005-0.01％體積量的三氟醋酸的乙腈溶液為流動相A，以含0.005-0.01％體積量的三氟醋酸的水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；檢測波長為210nm；柱溫為20℃；流速為每分鐘0.7ml；理論板數按紫丁香苷峰計算應不低于5000；所述梯度洗脫條件為：0-5min，流動相A 2％，流動相B 98％；5-10min，流動相A 2-5％，流動相B 98-95％；10-18min，流動相A 5-10％，流動相B 95-90％；18-30min，流動相A 10-15％，流動相B 90-85％；30-38min，流動相A 15-20％，流動相B 85-80％；38-50min，流動相A 20-23％，流動相B 80-77％；50-65min，流動相A 23-38％，流動相B 77-62％；65-75min，流動相A 38-55％，流動相B 62-45％；75-95min，流動相A 55-100％，流動相B 45-0％；95-110min，流動相A 100％，流動相B 0％；參照物溶液的制備：取紫丁香苷對照品、刺五加苷E對照品、毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml各含50μg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備：取注射液5-10ml，通過已預處理的固相萃取柱，先以水1ml洗脫，棄去水液，再用甲醇洗脫，收集洗脫液至2-4ml量瓶中，至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，記錄110分鐘的色譜圖，即得；紫丁香苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷的含量測定方法如下：照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以水為流動相B，進行梯度洗脫；檢測波長為260nm，理論板數按紫丁香苷峰計算應不低于2000；所述梯度洗脫條件為：0-10min，流動相A 25％，流動相B 75％；10-13min，流動相A 25-35％，流動相B 75-65％；13-30min，流動相A 35-65％，流動相B 65-40％；30-31min，流動相A 100％，流動相B 0％；31-35min，流動相A 100％，流動相B 0％；對照品溶液的制備：取紫丁香苷對照品、毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含紫丁香苷25μg、毛蕊異黃酮葡萄糖苷15μg的混合溶液，即得；供試品溶液的制備：取注射液，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。2.根據權利要求1所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：鑒別方法如下：(1)取注射液50-100ml濃縮至10-20ml后，加乙醇50-100ml，攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌1-3次，將沉淀物用5-10ml水溶解，取1-2ml置試管中，微熱后加入5％的α-萘酚乙醇溶液5-10滴，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸0.5-1ml，在兩液面接界處顯紫紅色環；(2)取注射液50-100ml，用二氯甲烷振搖提取1-3次，每次用量30-60ml，合并二氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇2-4ml使溶解，作為供試品溶液，二氯甲烷提取后的水液備用；另取異嗪皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1μl～4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝30-50∶0.3-0.6∶0.3-0.6為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍色熒光斑點；(3)取鑒別(2)項下二氯甲烷提取后的水液，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取1-3次，每次用量50-100ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2-3次，每次用量30-60ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸干，殘渣加水10-20ml使溶解，通過已處理好的內徑1.5cm，長15cm的DA－201大孔吸附樹脂柱，用水100-200ml洗脫，棄去洗脫液，再用15-30％的乙醇80-160ml洗脫，棄去洗脫液，再用35-50％的乙醇80-160ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2-4ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rg₁對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rb₁對照品及黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl～20μl，分別點于同一硅膠H高效薄層板上進行帶狀點樣，以三氯甲烷∶甲醇∶水∶甲酸＝10-20∶4-8∶0.5-2∶0.2-0.5為展開劑，于30℃以下展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。3.根據權利要求2所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：鑒別方法如下：(1)取注射液50ml濃縮至10ml后，加乙醇50ml，攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌2次，將沉淀物用5ml水溶解，取1ml置試管中，微熱后加入5％的α-萘酚乙醇溶液5滴，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸0.5ml，在兩液面接界處顯紫紅色環；(2)取注射液50ml，用二氯甲烷振搖提取2次，每次用量30ml，合并二氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液，二氯甲烷提取后的水液備用；另取異嗪皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1μl～2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝40∶0.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍色熒光斑點；(3)取鑒別(2)項下二氯甲烷提取后的水液，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次用量50ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次用量30ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，通過已處理好的內徑1.5cm，長15cm的DA-201大孔吸附樹脂柱，用水100ml洗脫，棄去洗脫液，再用20％的乙醇80ml洗脫，棄去洗脫液，再用40％的乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rg₁對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rb₁對照品及黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl～10μl，分別點于同一硅膠H高效薄層板上進行帶狀點樣，以三氯甲烷∶甲醇∶水∶甲酸＝15∶6∶1∶0.2為展開劑，于30℃以下展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。4.根據權利要求1所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：對5-羥甲基糠醛的含量檢查方法如下：按照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：取注射液1-2ml，作為供試品溶液；另取5-羥甲基糠醛對照品，精密稱定，加0.1％甲酸溶液稀釋制成每lml中含5μg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇：0.4％冰醋酸溶液＝2-8:92-98為流動相；檢測波長為284nm；柱溫為30℃；理論板數按5-羥甲基糠醛峰計算不低于4000；精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖；計算5-羥甲基糠醛含量。5.根據權利要求4所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：所述5-羥甲基糠醛的含量檢查方法中，流動相為甲醇：0.4％冰醋酸溶液＝4:96。6.根據權利要求1所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：斑蝥素的含量測定方法如下：照中國藥典2015年版四部通則0521中氣相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以5％二苯基-95％二甲基聚硅氧烷為固定相的石英毛細管柱，柱長為30m，內徑為0.32mm，膜厚度為0.25μm；柱溫為程序升溫：初始溫度為100℃，以每分鐘2℃的速率升溫至140℃；進樣口溫度為250℃，檢測器溫度為300℃；載氣為氮氣，流速為2.5±0.5ml/分鐘；分流進樣，分流流量3ml/min，分流比為1:1；理論板數按斑蝥素峰計算應不低于15000，相對標準偏差應不大于3.5％；對照品溶液的制備：取斑蝥素對照品，精密稱定，加二氯甲烷制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取注射液20-40ml，置分液漏斗中，加入1.8mol/L硫酸溶液2-4ml，混勻，精密加入二氯甲烷2-4ml，振搖提取，靜置分層，取二氯甲烷液，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各2μl，注入氣相色譜儀，測定，計算，即得。7.根據權利要求1所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：人參總皂苷的含量測定方法如下：照中國藥典2015年版四部通則0401中紫外-可見分光光度法測定：對照品溶液的制備：取人參皂苷Re對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含1.6mg的溶液，搖勻，即得；標準曲線的制備：精密量取對照品溶液0μl、20μl、40μl、60μl、80μl、100μl，分別置10ml具塞試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml，搖勻，置60℃水浴中加熱15分鐘，取出，用水冷卻2分鐘，加冰醋酸5ml，搖勻，照紫外—可見分光光度法，在544nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備：取注射液20-40ml，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取2-4次，每次20-30ml，合并三氯甲烷液，用水洗滌2-3次，每次5-10ml，棄去三氯甲烷液，洗液與三氯甲烷提取分層后的水液合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取2-4次，每次50-60ml，合并正丁醇液，加入無水硫酸鈉3-5g，攪拌，放至澄清；將正丁醇液移至蒸發皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量水溶解殘渣，通過已處理好的內徑1.5cm、長15cm的DA-201大孔吸附樹脂柱上，待液面接近棉花層后，用水100-200ml洗脫，控制流速為0.3-0.5ml/min，棄去洗液，再用65-75％乙醇80-100ml洗脫，收集洗脫液于蒸發皿中，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，并轉移至5-10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法：精密量取供試品溶液100μl，照標準曲線的制備項下的方法，自“置10ml具塞試管中”起依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的濃度，計算，即得。8.根據權利要求1-7任一項所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：檢測方法如下：性狀：注射液為淺黃色至淺棕色的澄明液體；鑒別：(1)取注射液50-100ml濃縮至10-20ml后，加乙醇50-100ml，攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌1-3次，將沉淀物用5-10ml水溶解，取1-2ml置試管中，微熱后加入5％的α-萘酚乙醇溶液5-10滴，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸0.5-1ml，在兩液面接界處顯紫紅色環；(2)取注射液50-100ml，用二氯甲烷振搖提取1-3次，每次用量30-60ml，合并二氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇2-4ml使溶解，作為供試品溶液，二氯甲烷提取后的水液備用；另取異嗪皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1μl～4μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝30-50∶0.3-0.6∶0.3-0.6為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍色熒光斑點；(3)取鑒別(2)項下二氯甲烷提取后的水液，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取1-3次，每次用量50-100ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2-3次，每次用量30-60ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸干，殘渣加水10-20ml使溶解，通過已處理好的內徑1.5cm，長15cm的DA－201大孔吸附樹脂柱，用水100-200ml洗脫，棄去洗脫液，再用15-30％的乙醇80-160ml洗脫，棄去洗脫液，再用35-50％的乙醇80-160ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2-4ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rg₁對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rb₁對照品及黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl～20μl，分別點于同一硅膠H高效薄層板上進行帶狀點樣，以三氯甲烷∶甲醇∶水∶甲酸＝10-20∶4-8∶0.5-2∶0.2-0.5為展開劑，于30℃以下展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查：(1)溶液的顏色：取注射液1-2ml，置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，按照中國藥典2015年版四部通則0901第一法與黃色8號標準比色液比較，不得更深；(2)pH值：3.8-5.8；(3)5-羥甲基糠醛：按照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：取注射液1-2ml，作為供試品溶液；另取5-羥甲基糠醛對照品，精密稱定，加0.1％甲酸溶液稀釋制成每lml中含5μg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇：0.4％冰醋酸溶液＝2-8:92-98為流動相；檢測波長為284nm；柱溫為30℃；理論板數按5-羥甲基糠醛峰計算不低于4000；精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖；計算5-羥甲基糠醛含量；(4)熾灼殘渣：取注射液1-2ml，置坩堝中，水浴上蒸干，按照中國藥典2015年版四部通則0841進行測定，不得過1.0％，以g/ml計；(5)熱原：取注射液20-40ml，用氯化鈉注射液或5％～10％葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔體重1kg注射10ml的劑量，按照中國藥典2015年版四部通則1142進行檢查，應符合規定；(6)異常毒性：取注射液，按照中國藥典2015年版四部通則1141進行檢查，按靜脈注射法給藥，應符合規定；(7)過敏反應：取注射液，按照中國藥典2015年版四部通則1147進行檢查，應符合規定；(8)溶血與凝聚：取注射液，按照中國藥典2015年版四部通則1148進行檢查，應符合規定；(9)其他：應符合中國藥典2015年版四部通則0102注射劑項下有關的各項規定；指紋圖譜：按照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以含0.005-0.01％體積量的三氟醋酸的乙腈溶液為流動相A，以含0.005-0.01％體積量的三氟醋酸的水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；檢測波長為210nm；柱溫為20℃；流速為每分鐘0.7ml；理論板數按紫丁香苷峰計算應不低于5000；所述梯度洗脫條件為：0-5min，流動相A 2％，流動相B 98％；5-10min，流動相A 2-5％，流動相B 98-95％；10-18min，流動相A 5-10％，流動相B 95-90％；18-30min，流動相A 10-15％，流動相B 90-85％；30-38min，流動相A 15-20％，流動相B 85-80％；38-50min，流動相A 20-23％，流動相B 80-77％；50-65min，流動相A 23-38％，流動相B 77-62％；65-75min，流動相A 38-55％，流動相B 62-45％；75-95min，流動相A 55-100％，流動相B 45-0％；95-110min，流動相A 100％，流動相B 0％；參照物溶液的制備：取紫丁香苷對照品、刺五加苷E對照品、毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml各含50μg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備：取注射液5-10ml，通過已預處理的固相萃取柱，先以水1ml洗脫，棄去水液，再用甲醇洗脫，收集洗脫液至2-4ml量瓶中，至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，記錄110分鐘的色譜圖，即得；含量測定：(1)總皂苷：照中國藥典2015年版四部通則0401中紫外-可見分光光度法測定：對照品溶液的制備：取人參皂苷Re對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含1.6mg的溶液，搖勻，即得；標準曲線的制備：精密量取對照品溶液0μl、20μl、40μl、60μl、80μl、100μl，分別置10ml具塞試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml，搖勻，置60℃水浴中加熱15分鐘，取出，用水冷卻2分鐘，加冰醋酸5ml，搖勻，照紫外-可見分光光度法，在544nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備：取注射液20-40ml，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取2-4次，每次20-30ml，合并三氯甲烷液，用水洗滌2-3次，每次5-10ml，棄去三氯甲烷液，洗液與三氯甲烷提取分層后的水液合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取2-4次，每次50-60ml，合并正丁醇液，加入無水硫酸鈉3-5g，攪拌，放至澄清；將正丁醇液移至蒸發皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量水溶解殘渣，通過已處理好的內徑1.5cm、長15cm的DA-201大孔吸附樹脂柱上，待液面接近棉花層后，用水100-200ml洗脫，控制流速為0.3-0.5ml/min，棄去洗液，再用65-75％乙醇80-100ml洗脫，收集洗脫液于蒸發皿中，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，并轉移至5-10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法：精密量取供試品溶液100μl，照標準曲線的制備項下的方法，自“置10ml具塞試管中”起依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的濃度，計算，即得；(2)紫丁香苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷：照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以水為流動相B，進行梯度洗脫；檢測波長為260nm，理論板數按紫丁香苷峰計算應不低于2000；所述梯度洗脫條件為：0-10min，流動相A 25％，流動相B 75％；10-13min，流動相A 25-35％，流動相B 75-65％；13-30min，流動相A 35-65％，流動相B 65-40％；30-31min，流動相A 100％，流動相B 0％；31-35min，流動相A 100％，流動相B 0％；對照品溶液的制備：取紫丁香苷對照品、毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含紫丁香苷25μg、毛蕊異黃酮葡萄糖苷15μg的混合溶液，即得；供試品溶液的制備：取注射液，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得；(3)斑蝥素：照中國藥典2015年版四部通則0521中氣相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以5％二苯基-95％二甲基聚硅氧烷為固定相的石英毛細管柱，柱長為30m，內徑為0.32mm，膜厚度為0.25μm；柱溫為程序升溫：初始溫度為100℃，以每分鐘2℃的速率升溫至140℃；進樣口溫度為250℃，檢測器溫度為300℃；載氣為氮氣，流速為2.5±0.5ml/分鐘；分流進樣，分流流量3ml/min，分流比為1:1；理論板數按斑蝥素峰計算應不低于15000，相對標準偏差應不大于3.5％；對照品溶液的制備：取斑蝥素對照品，精密稱定，加二氯甲烷制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取注射液20-40ml，置分液漏斗中，加入1.8mol/L硫酸溶液2-4ml，混勻，精密加入二氯甲烷2-4ml，振搖提取，靜置分層，取二氯甲烷液，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各2μl，注入氣相色譜儀，測定，計算，即得。9.根據權利要求8所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：檢測方法如下：性狀：產品為淺棕色的澄明液體；鑒別：(1)取注射液50ml濃縮至10ml后，加乙醇50ml，攪勻，濾過，沉淀物用乙醇洗滌2次，將沉淀物用5ml水溶解，取1ml，置試管中，微熱后加入5％的α-萘酚乙醇溶液5滴，搖勻，再沿管壁緩緩加入濃硫酸0.5ml，在兩液面接界處顯紫紅色環；(2)取注射液50ml，用二氯甲烷振搖提取2次，每次用量30ml，合并二氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液，二氯甲烷提取后的水液備用；另取異嗪皮啶對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各1μl～2μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷∶甲醇∶甲酸＝40∶0.5∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同的藍色熒光斑點；(3)取鑒別(2)項下二氯甲烷提取后的水液，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次用量50ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次用量30ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸干，殘渣加水10ml使溶解，通過已處理好的內徑1.5cm、長15cm的DA－201大孔吸附樹脂柱，用水100ml洗脫，棄去洗脫液，再用20％的乙醇80ml洗脫，棄去洗脫液，再用40％的乙醇80ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；另取人參皂苷Rg₁對照品、人參皂苷Re對照品、人參皂苷Rb₁對照品及黃芪甲苷對照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0502的薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl～10μl，分別點于同一硅膠H高效薄層板上進行帶狀點樣，以三氯甲烷∶甲醇∶水∶甲酸＝15∶6∶1∶0.2為展開劑，于30℃以下展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，置365nm波長的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；檢查：(1)溶液的顏色：取注射液1ml，置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，按照中國藥典2015年版四部通則0901第一法與黃色8號標準比色液比較，不得更深；(2)pH值：照中國藥典2015年版四部通則0631檢查，pH為3.8-5.8；(3)5-羥甲基糠醛：按照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：取注射液，作為供試品溶液；另取5-羥甲基糠醛對照品，精密稱定，加0.1％甲酸溶液稀釋制成每lml中含5μg的溶液，作為對照品溶液；照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇：0.4％冰醋酸溶液＝4:96為流動相；檢測波長為284nm；柱溫為30℃；理論板數按5-羥甲基糠醛峰計算不低于4000；精密量取供試品溶液與對照品溶液各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖；計算5-羥甲基糠醛含量；(4)熾灼殘渣：取注射液2ml，置坩堝中，水浴上蒸干，按照中國藥典2015年版四部通則0841進行測定，不得過1.0％，以g/ml計；(5)熱原：取注射液30ml，用氯化鈉注射液或5％～10％葡萄糖注射液稀釋至100ml，按家兔體重1kg注射10ml的劑量，按照中國藥典2015年版四部通則1142進行檢查，應符合規定；(6)異常毒性：取注射液，按照中國藥典2015年版四部通則1141進行檢查，按靜脈注射法給藥，應符合規定；(7)過敏反應：取注射液，按照中國藥典2015年版四部通則1147進行檢查，應符合規定；(8)溶血與凝聚：取注射液，按照中國藥典2015年版四部通則1148進行檢查，應符合規定；(9)其他：應符合中國藥典2015年版四部通則0102注射劑項下有關的各項規定；指紋圖譜：按照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，Kromasil100-5-C18，柱長為25cm，內徑為4.6mm，粒徑為5μm；以含0.005％體積量的三氟醋酸的乙腈溶液為流動相A，以含0.005％體積量的三氟醋酸的水溶液為流動相B，進行梯度洗脫；檢測波長為210nm；柱溫為20℃；流速為每分鐘0.7ml；理論板數按紫丁香苷峰計算應不低于5000；所述梯度洗脫條件為：0-5min，流動相A 2％，流動相B 98％；5-10min，流動相A 2-5％，流動相B 98-95％；10-18min，流動相A 5-10％，流動相B 95-90％；18-30min，流動相A 10-15％，流動相B 90-85％；30-38min，流動相A 15-20％，流動相B 85-80％；38-50min，流動相A 20-23％，流動相B 80-77％；50-65min，流動相A 23-38％，流動相B 77-62％；65-75min，流動相A 38-55％，流動相B 62-45％；75-95min，流動相A 55-100％，流動相B 45-0％；95-110min，流動相A 100％，流動相B 0％；參照物溶液的制備：取紫丁香苷對照品、刺五加苷E對照品、毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品適量，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml各含50μg的混合溶液，搖勻，即得；供試品溶液的制備：取注射液5ml，通過已預處理的固相萃取柱：6cc/500mg C18Cartridges，先以水1ml洗脫，棄去水液，再用甲醇洗脫，收集洗脫液至2ml量瓶中，至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取參照物溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，記錄110分鐘的色譜圖，即得；含量測定：(1)總皂苷：照中國藥典2015年版四部通則0401中紫外-可見分光光度法測定：對照品溶液的制備：取人參皂苷Re對照品，精密稱定，加甲醇制成每1ml含1.6mg的溶液，搖勻，即得；標準曲線的制備：精密量取對照品溶液0μl、20μl、40μl、60μl、80μl、100μl，分別置10ml具塞試管中，置水浴上揮去溶劑，立即取出，放冷，加5％香草醛冰醋酸溶液0.2ml、高氯酸0.8ml，搖勻，置60℃水浴中加熱15分鐘，取出，用水冷卻2分鐘，加冰醋酸5ml，搖勻，照紫外—可見分光光度法，在544nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標、濃度為橫坐標，繪制標準曲線；供試品溶液的制備：取注射液20ml，置分液漏斗中，用三氯甲烷振搖提取3次，每次20ml，合并三氯甲烷液，用水洗滌2次，每次5ml，棄去三氯甲烷液，洗液與三氯甲烷提取分層后的水液合并，置分液漏斗中，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次50ml，合并正丁醇液，加入無水硫酸鈉3g，攪拌，放至澄清；將正丁醇液移至蒸發皿中，用少量正丁醇洗滌無水硫酸鈉，洗液并入蒸發皿中，蒸干，用少量水溶解殘渣，通過已處理好的內徑1.5cm、長15cm的DA-201大孔吸附樹脂柱上，待液面接近棉花層后，用水100ml洗脫，控制流速為0.4ml/min，棄去洗液，再用70％乙醇80ml洗脫，收集洗脫液于蒸發皿中，置水浴上蒸干，殘渣加甲醇溶解，并轉移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得；測定法：精密量取供試品溶液100μl，照標準曲線的制備項下的方法，自“置10ml具塞試管中”起依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中人參皂苷Re的濃度，計算，即得；(2)紫丁香苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷：照中國藥典2015年版四部通則0512中高效液相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以水為流動相B，進行梯度洗脫；檢測波長為260nm，理論板數按紫丁香苷峰計算應不低于2000；所述梯度洗脫條件為：0-10min，流動相A 25％，流動相B 75％；10-13min，流動相A 25-35％，流動相B 75-65％；13-30min，流動相A 35-65％，流動相B 65-40％；30-31min，流動相A 100％，流動相B 0％；31-35min，流動相A 100％，流動相B 0％；對照品溶液的制備：取紫丁香苷對照品、毛蕊異黃酮葡萄糖苷對照品，精密稱定，加50％甲醇制成每1ml含紫丁香苷25μg、毛蕊異黃酮葡萄糖苷15μg的混合溶液，即得；供試品溶液的制備：取注射液，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得：(3)斑蝥素：照中國藥典2015年版四部通則0521中氣相色譜法測定：色譜條件與系統適用性試驗：以5％二苯基-95％二甲基聚硅氧烷為固定相的石英毛細管柱，柱長為30m，內徑為0.32mm，膜厚度為0.25μm；柱溫為程序升溫：初始溫度為100℃，以每分鐘2℃的速率升溫至140℃；進樣口溫度為250℃，檢測器溫度為300℃；載氣為氮氣，流速為2.5±0.5ml/分鐘；分流進樣，分流流量3ml/min，分流比為1:1；理論板數按斑蝥素峰計算應不低于15000，相對標準偏差應不大于3.5％；對照品溶液的制備：取斑蝥素對照品，精密稱定，加二氯甲烷制成每1ml含10μg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取注射液20ml，置分液漏斗中，加入1.8mol/L硫酸溶液2ml，混勻，精密加入二氯甲烷2ml，振搖提取，靜置分層，取二氯甲烷液，濾過，取續濾液，即得；測定法：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各2μl，注入氣相色譜儀，測定，計算，即得。10.根據權利要求8所述的抗腫瘤注射制劑的檢測方法，其特征在于：所述檢查項目中：5-羥甲基糠醛限度為：每ml注射液中不高于0.5mg；所述指紋圖譜表征項目中：供試品指紋圖譜分別呈現與參照物色譜峰保留時間相同的色譜峰，按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統，分析0min～85min圖譜，供試品指紋圖譜與對照指紋圖譜經相似度計算，相似度不低于0.88；含量測定項目中：每ml注射液含總皂苷以人參皂苷Re(C₄₈H₈₂O₁₈)計，不少于0.2mg；每ml注射液含刺五加以紫丁香苷(C₁₇H₂₄O₉)計，不少于13.0μg，含黃芪以毛蕊異黃酮葡萄糖苷(C₂₂H₂₂O₁₀)計，不少于7.0μg；每ml制劑含斑蝥以斑蝥素(C₁₀H₁₂O₄)計，為0.8μg～3.0μg。