本發(fā)明涉及一種采用葡萄孢霉屬(Botrytis)真菌的遺傳改良菌TBC-10，在發(fā)酵過(guò)程中流加肌醇解除葡萄糖阻遏的工藝來(lái)制備天然脫落酸的方法。該方法包括下列步驟：將葡萄孢霉TBC-10菌在第一級(jí)液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；將培養(yǎng)好的第一級(jí)種子液接種于第二級(jí)液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；在第三級(jí)液體培養(yǎng)基中流加補(bǔ)料，并同時(shí)流加肌醇進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)；以及從發(fā)酵培養(yǎng)液中收集所得的脫落酸。本發(fā)明采用基因工程獲得的遺傳改良菌，并配合流加肌醇進(jìn)行發(fā)酵的方法，可人為調(diào)控發(fā)酵體系中碳、氮比例，解除了葡萄糖阻遏，提高了菌體對(duì)培養(yǎng)基中其他糖類的利用率，使菌株以較高的底物轉(zhuǎn)化率和產(chǎn)物合成速率生產(chǎn)脫落酸，提高了產(chǎn)量和生產(chǎn)效率，大大節(jié)約了能耗和原材料，降低了生產(chǎn)成本，簡(jiǎn)化了生產(chǎn)工藝。

1.一種制備天然脫落酸的方法，它包含如下步驟：將能夠產(chǎn)生天然脫落酸的真菌在第一級(jí)液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所述的真菌是灰葡萄孢霉(Botrytis?cinerea)TBC-10，其保藏號(hào)為CGMCC?No.1889；將在上述第一級(jí)液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)好的第一級(jí)種子液接種到第二級(jí)液體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；將在上述第二級(jí)液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到的第二級(jí)種子液接種到第三級(jí)液體培養(yǎng)基中，在26℃發(fā)酵培養(yǎng)12-72小時(shí)后，開始進(jìn)行第三級(jí)液體培養(yǎng)基流加補(bǔ)料，并同時(shí)流加肌醇發(fā)酵培養(yǎng)；從上述發(fā)酵培養(yǎng)液中收集所得的脫落酸。2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中，肌醇流加補(bǔ)料為連續(xù)流加或間歇式流加方式。3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中連續(xù)流加為勻速或非勻速流加。4.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述的連續(xù)流加方式，是以0.01-10μg/L·h的流加速率將肌醇連續(xù)流加入第三級(jí)發(fā)酵罐，直至停止發(fā)酵前10小時(shí)。5.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述的間歇式流加肌醇方式，是每間歇8-30小時(shí)補(bǔ)料1-5次。6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中每間隔10小時(shí)補(bǔ)料1次，每次補(bǔ)加量為0.05-50mg/L發(fā)酵液。7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中每次補(bǔ)加量為0.1-10mg/L發(fā)酵液。8.灰葡萄孢霉(Botrytis?cinerea)TBC-10，其特征在于所述菌株的保藏號(hào)為CGMCC?No.1889。