本發(fā)明涉及腈水合酶生產(chǎn)菌株紫紅紅球菌M33的培養(yǎng)方法，其中使用一種培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基基于12至60mM磷酸鹽緩沖液并在培養(yǎng)期間滿足細(xì)胞對(duì)磷的需求和維持pH在5.5-9.0的范圍內(nèi)，并且當(dāng)其中已有量的葡萄糖已經(jīng)耗盡時(shí)，向培養(yǎng)基中加入乙酸作為新碳源。本發(fā)明也涉及該方法中所用的培養(yǎng)基。

1.腈水合酶生產(chǎn)菌株紫紅紅球菌(Rhodococcus?rhodochrous)M33的培養(yǎng)方法，該菌株以保藏號(hào)DSM?14230保藏于德國(guó)微生物保藏中心，Marschroder?Weg?1b，D-38124，不倫瑞克，德國(guó)，該方法特征在于使用一種培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基基于12至60mM磷酸鹽緩沖液并滿足細(xì)胞對(duì)磷的需求和在培養(yǎng)期間維持pH在5.5-9.0的范圍內(nèi)，其中所述培養(yǎng)基還包含CoCl₂，MgSO₄，玉米提取物，葡萄糖和尿素；并且當(dāng)所有最初提供的葡萄糖已經(jīng)耗盡時(shí)，向所述培養(yǎng)基中計(jì)量加入尿素、CoCl₂和作為新碳源的乙酸和/或其水溶性鹽。2.如權(quán)利要求1定義的方法，特征在于將玉米提取物在所述培養(yǎng)基中用作生長(zhǎng)因子。3.如權(quán)利要求2定義的方法，特征在于將玉米漿和/或玉米浸漬溶液用作玉米提取物。4.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于所述的玉米提取物在所述的培養(yǎng)基中以1至10g/L的濃度使用。5.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于將葡萄糖和乙酸用作培養(yǎng)基中的碳源。6.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于所述的培養(yǎng)基含有濃度為20至90g/L的葡萄糖作為碳源。7.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于乙酸最初以其水溶性鹽的形式加入。8.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于所用的水溶性乙酸鹽是乙酸鈉。9.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于將水溶性乙酸鹽用于最初的批培養(yǎng)，并且當(dāng)pH升至7.5-8.5，計(jì)量加入乙酸。10.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于葡萄糖消耗后，水溶性乙酸鹽以1至4g/L的濃度計(jì)量加入。11.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于隨后以20至50％濃度水溶液的形式加入乙酸。12.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于在pH7.5-8.5通過pH-stat的補(bǔ)料計(jì)量加入乙酸溶液。13.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于在所述培養(yǎng)基中計(jì)量加入尿素和CoCl₂×6H₂O。14.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于將一部分尿素作為誘導(dǎo)劑加入用作最初的批培養(yǎng)物的培養(yǎng)基，并且當(dāng)最初提供的葡萄糖已經(jīng)耗盡時(shí)，再次計(jì)量加入尿素。15.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于在指數(shù)生長(zhǎng)期的開始向基于葡萄糖作為碳源的培養(yǎng)基中加入CoCl₂×6H₂O，并在葡萄糖耗盡后再次計(jì)量加入。16.如權(quán)利要求1-3任意一項(xiàng)定義的方法，特征在于在發(fā)酵罐培養(yǎng)期間控制氧的供應(yīng)使得相對(duì)O₂分壓大于30％。17.由下述成分組成的培養(yǎng)基在根據(jù)權(quán)利要求1-16之一的方法中的用途：a.)7.9g/L?Na₂HPO₄×12H₂Ob.)1.8g/L?KH₂PO₄c.)0.02-0.04g/L?CoCl₂×6H₂Od.)1.0g/L?MgSO₄×7H₂Oe.)從1至10g/L的玉米提取物f.)從20至90g/L的葡萄糖g.)從4至20g/L的尿素和h)作為進(jìn)一步碳源的1-4g/L的乙酸和/或其水溶性鹽。18.如權(quán)利要求17的用途，特征在于所述培養(yǎng)基基于12至60mM磷酸鹽緩沖液并滿足細(xì)胞對(duì)磷的需求，且在培養(yǎng)期間維持pH在5.5-9.0的范圍內(nèi)。