本發明提供一種產谷氨酸的溫敏型重組谷氨酸棒狀桿菌，是通過改造野生型谷氨酸棒桿菌(C.glutamicum ATCC 13032)，敲除其基因組中肽聚糖合成途徑中的兩個關鍵基因UDP?N?烯醇式乙酰葡萄糖胺轉移酶基因(murA)和UDP?N?乙酰胞壁酸脫氫酶基因(murB)，獲得溫敏型重組菌，重組菌的谷氨酸產量得到明顯提升，在發酵溫度提高至38.5℃情況下谷氨酸產量為4?7g/L。

1.一種產谷氨酸的溫敏型重組谷氨酸棒狀桿菌，其特征在于敲除野生型谷氨酸棒桿菌
C.glutamicum ATCC 13032的UDP-N-烯醇式乙酰葡萄糖胺轉移酶基因和UDP-N-乙酰胞壁酸
脫氫酶基因，獲得溫敏型重組菌。
2.如權利要求1所述的一種產谷氨酸的溫敏型重組谷氨酸棒狀桿菌，其特征在于，以
C.glutamicum ATCC 13032為出發菌株，通過PCR方法擴增得到murA基因上游同源臂和murB
基因下游同源臂，并通過重疊PCR將上下游同源臂重疊，得到重疊片段；將重疊片段用EcoR
I和Hind III雙酶切，與同樣雙酶切的表達載體pK18mobsacB連接，構建重組質粒；將重組質
粒電轉化至菌株C.glutamicum ATCC 13032中；篩選出完成了兩次同源重組的重組子，實現
murA、murB基因的敲除，獲得溫敏型重組菌。
3.權利要求1或2所述溫敏型重組谷氨酸棒狀桿菌的用途，其特征在于，用于發酵生產
谷氨酸。
4.一種利用權利要求1或2所述重組谷氨酸棒狀桿菌發酵生產谷氨酸的方法，其特征在
于，包括如下步驟：
(1)將菌體接種到斜面培養基中活化，32℃培養24-36h；
(2)將活化好的菌種接入種子培養基中，32℃，200rpm，培養6-8h；
(3)將培養好的種子按10％接種量接入發酵培養基中，32℃，200rpm發酵培養；
(4)待發酵培養至菌體OD₆₀₀＝12-16時，將發酵溫度提高至38.5℃，200rpm培養至總發
酵28-32h；
所述斜面培養基的組成為：蛋白胨1％，酵母粉0.5％，牛肉膏1％，NaCl 0.25％，MgSO₄
0.05％，KH₂PO₄ 0.1％，玉米漿2％，瓊脂2％；
所述種子培養基的組成為：葡萄糖30g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.2g/L，MgSO₄·7H₂O 0.8g/L，
MnSO₄ 2mg/L，FeSO₄ 2mg/L，V_B1 0.3mg/L，V_H 0.2mg/L，酵母粉10g/L，蛋白胨5g/L，尿素0.5g/
L，Met1g/L；
所述發酵培養基的組成為：葡萄糖8g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.4g/L，V_H 0.35mg/L，V_B10.5mg/
L，甜菜堿5g/L，MnSO₄ 30mg/L，FeSO₄ 30mg/L，MgSO₄·7H₂O 2g/L，酵母粉15g/L，蛋白胨5g/
L。