1.一種高產L-色氨酸的大腸桿菌(Escherichia?coli)工程菌,其
特征在于,其是以大腸桿菌W3110為出發菌,將tac啟動子突變體與
trpEfbrDCBA基因串聯后再插入到基因組上進行表達,同時失活或敲除
大腸桿菌W3110中的tnaA、trpR和tyrR基因,并突變tyrA和pheA基因,
使其表達的酶活力弱化,并向改造后的菌株中轉入含有串聯表達
AroFfbr、tktA、ppsA以及來源于枯草芽孢桿菌的SerA基因的低中拷貝
質粒而構建得到的;
其中,所述tac啟動子突變體的堿基序列如SEQ?ID?No.3所示,其
在基因組上的整合位點為trpL-trpE基因處,以串聯的tac啟動子突變體
及trpEfbrDCBA基因替換trpL-trpE基因;
所述低中拷貝質粒的載體為pACYC184;
所述的突變tyrA基因是將tyrA基因編碼的第131位氨基酸殘基H
突變為A;
所述的突變pheA基因是將pheA基因編碼的第48位氨基酸殘基D
突變為Q;
所述trpEfbrDCBA基因為抗反饋抑制的鄰氨基苯甲酸合成酶基
因,其核苷酸序列如SEQ?ID?No.32所示;
所述AroFfbr基因為來源于大腸桿菌K12的磷酸-2-脫氫-3-脫氧庚
糖酸醛縮酶DAHP基因的抗反饋抑制突變基因,其編碼的第148位氨
基酸殘基為亮氨酸(L)。
2.根據權利要求1所述的高產L-色氨酸的大腸桿菌(Escherichia?
coli)工程菌,其為大腸桿菌工程菌XT0015,保藏號為CCTCC?M
2011316。
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