1.一種具有免疫調節作用的大石花菜多糖的制備方法,其特征在于,所述的制備方法包括如下步驟:(1)將干燥大石花菜粉碎、過20目篩;大石花菜粉末按照料液比1:30,80℃超聲輔助提取2.5小時,得水提液,60℃減壓濃縮,向濃縮液加入兩倍體積的無水乙醇,室溫下靜置12小時沉淀多糖,8000rpm、10分鐘、4℃離心收集沉淀;(2)蒸餾水溶解沉淀,使用Sevage法除去水提液蛋白質,靜置12小時,8000rpm離心10分鐘取上清液,隨后60℃減壓濃縮除去有機試劑并將溶液濃縮冷凍干燥得粗多糖;(3)取上述粗多糖配置成濃度為20mg/mL的溶液,0.45μm濾膜過濾后,經DEAE-52纖維素離子交換柱分離,上樣量為5mL,依次用濃度為0、0.1、0.3、0.5、0.7、1.0mol/LNaCl溶液洗脫,自動部分收集器收集,流速為1mL/min,6分鐘每管;采用苯酚-硫酸法檢測,以試管號為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制洗脫曲線,收集0.3mol/LNaCl溶液洗脫后的組分,合并后經濃縮、透析、冷凍干燥得到大石花菜多糖A-1;(4)上述大石花菜多糖A-1配置成濃度為50mg/mL的溶液,0 .22μm濾膜過濾后,經Sephadex G-100柱分離,上樣量為5mL,用0.3mol/L NaCl溶液洗脫,自動部分收集器收集,流速為1mL/min,6分鐘每管;采用苯酚-硫酸法檢測,以試管號為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制洗脫曲線,收集第5-35管合并后經濃縮、透析、冷凍干燥分別得大石花菜純多糖A-11,即具有免疫調節作用的大石花菜多糖。2.根據權利要求1所述的制備方法制得的具有免疫調節作用的大石花菜多糖。3.根據權利要求2所述的具有免疫調節作用的大石花菜多糖,其特征在于,所述的具有免疫調節作用的大石花菜多糖的平均相對分子量為28807Da,主要由木糖和半乳糖組成。4.根據權利要求2、3任一所述的具有免疫調節作用的大石花菜多糖在制備免疫調節劑中的應用。5.根據權利要求2、3任一所述的具有免疫調節作用的大石花菜多糖在制備抵抗LPS誘導THP-1產生的細胞毒性的藥物中的應用,其中大石花菜多糖濃度為5ug/mL。
展開