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一種性能穩定的黑米花青素單體及分子修飾制備方法

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-10-30
  • 技術成熟度:通過中試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201910031833.7 
  • 技術(專利)名稱 一種性能穩定的黑米花青素單體及分子修飾制備方法 
  • 項目單位 合肥工業大學
  • 發明人 孫漢巨,何錢,王軍輝,操小棟,葉永康,朱勇生,何述棟,唐明明,趙金龍,涂李軍,張左勇,孫先保,余敏 
  • 行業類別 智慧健康-其他
  • 技術成熟度 通過中試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 趙倚
  • 發布時間 2021-10-30  
  • 01

    項目簡介

    本發明涉及一種提高黑米花青素單體(矢車菊素?3?葡萄糖苷,C3G)穩定性的分子修飾方法。具體操作步驟如下:(1)清洗去雜;(2)粉碎浸提;(3)離心分離;(4)樹脂純化;(5)納濾濃縮;(6)真空冷凍干燥;(7)C3G提取純化;(8)真空冷凍干燥;(9)酶法修飾C3G;(10)C3G修飾產物分離;(11)真空冷凍干燥。本發明首先利用溫和的條件從黑米中分離純化出黑米花青素單體C3G,確保反應底物的完整性;再利用酶法修飾C3G,整個過程安全、高效、反應條件溫和及便于控制,所選取的Novozym 435脂肪酶專一性強,修飾產物較為單一,可以利用制備型液相色譜高效率地分離純化,最后通過真空冷凍干燥技術干燥修飾產物,最大程度地保留花青素結構的穩定性。
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  • 02

    說明書

    1.一種性能穩定的黑米花青素單體的制備方法,其特征在于:所述黑米花青素單體為酰化矢車菊素-3-葡萄糖苷,由矢車菊素-3-葡萄糖苷經過p-香豆酸修飾制得,酰化矢車菊素-3-葡萄糖苷為棕褐色粉末狀,其純度≥95%;具體制備操作步驟如下:利用4A分子篩將反應介質干燥,將酰基供體和矢車菊素-3-葡萄糖苷(C3G)粉末按照10:1的摩爾比加入干燥后的反應介質中,反應物與反應介質的固液比為1:1,連續攪拌至完全溶解,加入Novozym 435脂肪酶,使Novozym 435脂肪酶在溶液中濃度為5 mg/mL,最后加入濃度100 mg/mL的4A分子篩吸收反應過程中產生的水,在30℃下,反應100h,得到矢車菊素-3-葡萄糖苷反應液;所述反應介質為叔戊醇或乙腈或正丁醇中的一種;所述酰基供體為p-香豆酸;所述矢車菊素-3-葡萄糖苷(C3G)粉末的純度大于99.0%;通過制備型液相色譜,利用乙腈洗脫,得到只含有矢車菊素-3-葡萄糖苷修飾產物的分離液;將所述分離液預冷凍,真空冷凍干燥機中,在真空度0.05~0.1Mpa、冷凍干燥溫度-20~-60 ℃條件下,干燥至水分含量≤5%,得到棕褐色粉末狀的酰化矢車菊素-3-葡萄糖苷;制備矢車菊素-3-葡萄糖苷的具體操作步驟如下:(1)清洗去雜除去黑米中肉眼可見的雜質和霉變的顆粒;(2)粉碎浸提用去離子水清洗除雜后的黑米,粉碎,過50~100目篩;按照質量體積比1 Kg:10~20 L取黑米和水,加入濃度1~3%的檸檬酸溶液調節pH為2.5~6.0,在20~55℃下,浸提2~5 h,得到黑米花青素浸提液;(3)離心分離離心處理黑米花青素浸提液,使固液分離,取上清液,得到黑米花青素水提液;具體操作是:通過碟片式離心機,在5000~10000 r/min下,除去黑米花青素浸提液中的淀粉、蛋白質、多糖等雜質;(4)樹脂純化利用AB-8樹脂純化黑米花青素水提液,乙醇洗脫,收集黑米花青素乙醇洗脫液;具體操作是:先用3~9倍柱體積的去離子水洗脫柱子,再按照AB-8樹脂體積的1~4倍進行上樣,最后用濃度為65~95%的乙醇洗脫,洗脫體積2~5倍柱體積;(5)納濾濃縮利用分子量200~400 Da的納濾膜濃縮黑米花青素乙醇洗脫液,收集截留液,得到黑米花青素濃縮液;納濾濃縮條件:壓力0.4~0.8 MPa、溫度20~45℃條件下冷凍干燥;(6)制備黑米花青素粗提物將黑米花青素濃縮液真空冷凍干燥至水分含量≤5%,獲得粉末狀的黑米花青素粗提物;真空干燥操作如下:在溫度0~-2 ℃條件下,將黑米花青素濃縮液預冷凍0.5~1h;在真空冷凍干燥機中,真空度0.05~0.1Mpa、溫度-20~-60℃條件下;(7)矢車菊素-3-葡萄糖苷提取純化按體積比1:3-5,將黑米花青素粗提物用酸液復溶,通過制備型液相色譜,利用甲醇和乙腈洗脫,得到只含有矢車菊素-3-葡萄糖苷的分離液;所述酸液為濃度100%的p-香豆酸;(8)真空冷凍干燥將矢車菊素-3-葡萄糖苷的分離液真空冷凍干燥至水分含量≤5%,即得矢車菊素-3-葡萄糖苷(C3G)粉末;具體操作是:在溫度0~-2 ℃條件下,將矢車菊素-3-葡萄糖苷分離液預冷凍0.5~1h;在真空冷凍干燥機中,真空度0.05~0.1Mpa、溫度-20~-60℃條件下,干燥至水分含量≤5%,獲得粉末狀的矢車菊素-3-葡萄糖苷。
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