本發明提供一種結核分枝桿菌TB檢測試劑盒，所述試劑盒中包括核酸釋放劑和PCR反應液，所述核酸釋放劑包含莎梵婷（surfactin）0.01~0.5mM/L，氯化鉀20~300mM/L，十二烷基磺酸鈉0.01~2%和乙醇0.05~1%；所述PCR反應液中包含用于靶多核苷酸擴增的上游引物、下游引物和用于靶多核苷酸檢測的探針。使用本發明試劑盒中的核酸釋放劑釋放核酸的方法與煮沸法的檢測結果沒有明顯差異，而本發明中提取核酸時采用強烈的蛋白變性劑，快速破壞病原體外殼蛋白結構，釋放出病原體核酸，無需加熱即可完成DNA的釋放和提取；本發明試劑盒檢測TB的靈敏度可達400copies/ml，定量線性范圍為400~4.00E+09copies/ml；應用該試劑盒可以對痰液等未知樣本中的TB?DNA進行快速準確的檢測，為診斷TB感染提供可靠的實驗依據。

1.一種結核分枝桿菌TB檢測試劑盒，所述試劑盒中包括核酸釋放劑和PCR反應液，所述
核酸釋放劑包含莎梵婷0.01～0.5mmol/L，氯化鉀20～300mmol/L，十二烷基磺酸鈉0.01～
2％和乙醇0.05～1％；所述PCR反應液中包含用于靶多核苷酸擴增的上游引物、下游引物和
用于靶多核苷酸檢測的探針，
且用于靶多核苷酸的上游引物序列為5'-ACGGATAGGGGATCTCAGTACAC-3'，
用于靶多核苷酸的下游引物序列為5'-CGTCTCGGCTAGTGCATTGTC-3'，
用于靶多核苷酸的探針序列為5'-FAM-TTCCGACCGCTCCGACCGAC-BHQ1-3'；
所述試劑盒中還包括內標，所述內標序列為5’-
GTGTCTGCGGCGTTTTATCATCTTCCTCTGTCATCCAGTGCAAGTCTTGATCCTGTCGTTGGTTCTTCTGGACTATC
AAGGTATGTTGCCCGTTTGT-3’；
所述PCR反應液中還包括用于內標檢測的上游引物、下游引物和探針，
內標上游引物序列為5’-GTGTCTGCGGCGTTTT ATCAT-3’，
內標下游引物序列為5’-ACAAACGGGCAACATACCTTG-3，
內標探針序列為5’-HEX-TCATCCAGTGCAAGTCTTGATCCTGTC-3’；
所述試劑盒中還包括酶混合液，所述酶混合液中包含Taq酶和0.5～2U/μl的尿嘧啶DNA
糖基化酶，同時在所述PCR反應液中還包含dUTP；
所述試劑盒中還包括TB定量參考品、TB陽性對照和TB陰性對照。