本發(fā)明公開了一種鄰苯二甲酸二庚酯完全抗原及其制備方法：以4-硝基鄰苯二甲酸為原料，經(jīng)過酯化、還原及重氮化反應(yīng)后，再與牛血清蛋白（BSA）或卵清白蛋白（OVA）偶聯(lián)等一系列步驟后，合成了鄰苯二甲酸二庚酯人工抗原。本發(fā)明的制備方法簡單可行，制備的完全抗原可用于免疫分析。

1.鄰苯二甲酸二庚酯完全抗原的制備方法，其特征是，以4-硝基鄰苯二甲酸為原料，
經(jīng)過酯化、還原和偶聯(lián)反應(yīng)合成；具體步驟如下：
（1）4-硝基鄰苯二甲酸二庚酯的合成：在4-硝基鄰苯二甲酸中加入庚醇，攪拌條件
下加入催化劑，在115-125℃下攪拌回流，減壓蒸去未反應(yīng)的庚醇和反應(yīng)生成的水，趁熱
倒入冰水中，在攪拌下滴加碳酸鈉溶液，直到水層的pH值為6.5-7.2后，分離出油狀物經(jīng)
后續(xù)處理，得到黃色油狀液體4-硝基鄰苯二甲酸二庚酯；所述的庚醇具體是正庚醇；所述
的催化劑為濃鹽酸或濃硫酸；所述的碳酸鈉溶液質(zhì)量分數(shù)為10-15%；
（2）4-氨基鄰苯二甲酸二庚酯的合成：在4-硝基鄰苯二甲酸二庚酯中加入甲苯或苯，
攪拌條件下加入還原劑，分次滴加濃鹽酸，室溫下反應(yīng)20-40分鐘后，繼續(xù)加入還原劑，
攪拌反應(yīng)完成后，將溶液傾入冷水中，中和反應(yīng)至堿性，分離出甲苯或苯層，水層再萃取
一次，合并萃取液，干燥、減壓除去甲苯或苯，得到淡黃色油狀液體4-氨基鄰苯二甲酸二
庚酯；
（3）鄰苯二甲酸二庚酯完全抗原的合成：取4-氨基鄰苯二甲酸二庚酯溶于鹽酸中，
放置冰水浴中冷卻，攪拌并保持混合物的溫度在4℃以下，避光條件下，滴入亞硝酸鈉的
水溶液，并隨時補充冰塊以保持溶液溫度，繼續(xù)攪拌反應(yīng)20-40min，然后，向反應(yīng)體系中
逐漸加入溶有BSA或OVA的緩沖溶液，反應(yīng)逐漸有橙紅色溶液出現(xiàn)，繼續(xù)反應(yīng)1.5-3小時，
得到抗原粗產(chǎn)品，經(jīng)后續(xù)處理得到橙紅色產(chǎn)品鄰苯二甲酸二庚酯完全抗原。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟（1）正庚醇的用量與4-硝基鄰
苯二甲酸的物質(zhì)的量比為2:1～3:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征是，正庚醇的用量與4-硝基鄰苯二甲酸
的物質(zhì)的量比為2.5:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，催化劑的用量與4-硝基鄰苯二甲酸
物質(zhì)量比為1:7～2:7。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征是，催化劑的用量與4-硝基鄰苯二甲酸
物質(zhì)量比為1.5:7。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，碳酸鈉溶液質(zhì)量分數(shù)為12-14%。
7.根據(jù)權(quán)利要6所述的制備方法，其特征是，碳酸鈉溶液質(zhì)量分數(shù)為13%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟（2）所述還原劑為鋅粉、鐵粉、
Sn+HCl或LiAlH₄。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征是，還原劑的用量與4-硝基鄰苯二甲酸
二庚酯質(zhì)量的比例為3:1～2.6:1。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的制備方法，其特征是，還原劑的用量與4-硝基鄰苯二甲酸
二庚酯質(zhì)量的比例為2.8:1。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟（2）所述中和反應(yīng)使用1mol
／L的氫氧化鈉溶液，萃取時使用甲苯或苯，干燥時使用無水硫酸鈉。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，所述甲苯或苯與4-硝基鄰苯二甲酸
二庚酯質(zhì)量的比例為30:1～24:1。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的制備方法，其特征是，甲苯或苯與4-硝基鄰苯二甲酸二
庚酯質(zhì)量的比例為26:1。
14.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是，步驟（3）所述緩沖溶液為BSA或
OVA的硼酸鈉或PBS緩沖溶液，pH為7.4-9.5。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的制備方法，其特征是，步驟（3）所述緩沖溶液為BSA的
硼酸鈉緩沖液，pH為9.2。