1.一種FT3體外診斷試劑盒,其特征在于,包括微孔板、校準品、質控品、酶結合物、發光底物液和濃縮洗滌液;其中微孔板中含有小分子半抗原FT3耦聯載體蛋白得到的小分子耦聯蛋白;校準品與質控品為已知濃度的FT3抗原;酶結合物中含有FT3酶標抗體;發光底物液包括發光底物液A和發光底物液B,發光底物液A含有魯米諾,發光底物液B含有辣根過氧化物酶穩定劑、過氧化氫;濃縮洗滌液中含有氯化鈉和吐溫-20;所述的小分子耦聯蛋白,為使用EDC將小分子半抗原FT3和載體蛋白BSA進行耦聯得到的小分子耦聯蛋白;將小分子半抗原FT3和載體蛋白BSA進行耦聯具體方法為:①平衡EDC,NHS至室溫;②將EDC、NHS、BSA分別用活化緩沖液溶解;活化緩沖液包括:0.1M的MES,0.5M的NaCl,調節pH為6.0;EDC用活化緩沖液溶解,終濃度為45-55mg/mL,NHS同樣用活化緩沖液溶解,終濃度為45-55mg/mL,BSA用活化緩沖液溶解,終濃度為4.5-5.5mg/mL;③將2-4體積份的EDC溶液與5-10體積份BSA溶液混合后,加入與EDC等量的NHS溶液,室溫反應10-20分鐘,后再加入1-2體積份的EDC;再室溫反應10-20分鐘;④加入巰基乙醇終止EDC反應,得到活化蛋白EDC-BSA;⑤加入與活化蛋白等摩爾的目的小分子半抗原FT3,室溫反應1.5-3小時;⑥加入Tris終止反應,得到耦聯蛋白BSA-FT3;Tris為20-50mmol/L;⑦加入脫鹽柱脫鹽柱先以1000g,2min將里面的儲存液排出,然后加入0.01MPBS以同樣的轉速離心3-5次后,加入反應的耦聯蛋白,離心后,即為耦聯產物;制備試劑盒,步驟為:①將含有定量小分子耦聯蛋白的包被液加入到微孔板中,37度放置2小時;②甩干板條,加入封閉液,37度放置2小時;③洗滌一次后,放入真空干燥箱4-6小時;④真空封袋后,放入4度冰箱。
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