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一種含溶原性噬菌體抗病毒尿素及其制備方法

  • 專利類型:發(fā)明專利
  • 有效期:不限
  • 發(fā)布日期:2021-12-29
  • 技術(shù)成熟度:通過小試
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態(tài)核實
  • 簽署交易協(xié)議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(shù)(專利)類型 發(fā)明專利
  • 申請?zhí)?專利號 CN201510095967.7 
  • 技術(shù)(專利)名稱 一種含溶原性噬菌體抗病毒尿素及其制備方法 
  • 項目單位 山東潤銀生物化工股份有限公司
  • 發(fā)明人 孟廣銀,吳文慧,王志勇,陳振偉,林翠華,王愛云 
  • 行業(yè)類別 醫(yī)藥制造-中藥飲片
  • 技術(shù)成熟度 通過小試
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯(lián)系人 朱鐵宇
  • 發(fā)布時間 2021-12-29  
  • 01

    項目簡介

    本發(fā)明公開了一種含溶原性噬菌體抗病毒尿素及其制備方法,成分包括溶原性噬菌體0.25~0.5wt%和尿素99~99.5wt%,包括溶原性噬菌體的采集、篩選、培養(yǎng)以及高塔噴霧造粒等過程。本發(fā)明尿素中包含的溶原性噬菌體在適宜的溫度、濕度、通氣、營養(yǎng)等條件下迅速增值釋放出大量子代噬菌體,感染土壤中積累的病毒細菌致其死亡,達到抗病毒的目的,同時也感染土壤中脲酶菌、硝化酶菌、氨基酶菌,減緩尿素的分解,減少NH、CO的揮發(fā),達到延長肥效的作用。本發(fā)明含溶原性噬菌體抗病毒尿素廣泛適用玉米、小麥、花生、地瓜、棉花、蔬菜等多種農(nóng)作物。
    展開
  • 02

    說明書

    1.一種含溶原性噬菌體抗病毒尿素,其特征在于:成分包括溶原性噬菌體0.25~0.5wt%和尿素99~99.5wt%;所述的尿素含氮量45~46.5wt%,含亞甲基二脲0.2~0.5wt%,以HCHO計;所述的溶原性噬菌體是通過下述方法得到的,制備溶原性噬菌體發(fā)酵液:在動物的排泄物中篩選出被噬菌體感染的宿主菌,即溶原性噬菌體,將得到的溶原性噬菌體放入培養(yǎng)基中,搖床內(nèi)37℃恒溫培養(yǎng)24h,得培養(yǎng)液;將得到的培養(yǎng)液用接種環(huán)涂于瓊脂平板上,網(wǎng)狀劃線后,置于保溫箱內(nèi),恒溫37℃放置24h,挑選出生長粗壯的溶原性噬菌體重新放入培養(yǎng)基中,在搖床中37℃繼續(xù)培養(yǎng)24h,如此重復5次,得單菌落的溶原性噬菌體種子液,然后放入裝有培養(yǎng)基的反應罐內(nèi),37℃厭氧培養(yǎng)30h,過濾,得到溶原性噬菌體發(fā)酵液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含溶原性噬菌體抗病毒尿素,其特征在于:所述的溶原性噬菌體包括溶原性大腸桿菌噬菌體、溶原性綠膿桿菌噬菌體和溶原性葡萄球菌噬菌體。3.一種權(quán)利要求1所述含溶原性噬菌體抗病毒尿素的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:(1)制備溶原性噬菌體發(fā)酵液在動物的排泄物中篩選出被噬菌體感染的宿主菌,即溶原性噬菌體,將得到的溶原性噬菌體放入培養(yǎng)基中,搖床內(nèi)37℃恒溫培養(yǎng)24h,得培養(yǎng)液;將得到的培養(yǎng)液用接種環(huán)涂于瓊脂平板上,網(wǎng)狀劃線后,置于保溫箱內(nèi),恒溫37℃放置24h,挑選出生長粗壯的溶原性噬菌體重新放入培養(yǎng)基中,在搖床中37℃繼續(xù)培養(yǎng)24h,如此重復5次,得單菌落的溶原性噬菌體種子液,然后放入裝有培養(yǎng)基的反應罐內(nèi),37℃厭氧培養(yǎng)30h,過濾,得到溶原性噬菌體發(fā)酵液;(2)高塔噴霧造粒制備含溶原性噬菌體的尿素用高壓熔融泵將熔融狀態(tài)的尿素,即尿液打入造粒塔頂部的尿液噴射器,將尿液噴灑為細霧狀,同時將步驟(1)得到的溶原性噬菌體發(fā)酵液打入尿素造粒塔頂部的旋流式噴射器,溶原性噬菌體發(fā)酵液噴灑為細霧狀,上述兩種細霧狀的微滴在降落過程中均勻混合,逐步聚集形成顆粒,溶原性噬菌體發(fā)酵液被包含在尿素顆粒中,即得本發(fā)明含溶原性噬菌體抗病毒尿素。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:步驟(1)中所述的溶原性噬菌體,可通過光學顯微鏡篩選,其形態(tài)為噬菌體頭部和尾部吸附在宿主菌細胞壁上。5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:步驟(1)所述的培養(yǎng)基制備方法是:分別稱取以下重量份的原料:葡萄糖20、牛肉蛋白胨5、酵母粉5、磷酸二氫鉀2、磷酸氫二鉀2、氯化鈣1、硫酸鎂1和純凈水64,混合,攪拌溶解即可。6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,,其特征在于:步驟(1)中溶原性噬菌體接種量為培養(yǎng)基質(zhì)量的3%。7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:步驟(1)中反應罐選取帶攪拌的不銹鋼反應釜,裝料前需做無菌處理,裝料后進行實罐滅菌,冷卻后,再移入種子液;具體方法為:首先用水清洗干凈,進行空罐滅菌,用150℃的水蒸氣蒸煮20min,冷卻至37℃,然后將預先制備的培養(yǎng)基裝入經(jīng)滅菌處理的生化反應器內(nèi),進行實罐滅菌溫度110℃,時間15min,滅菌后在反應器夾套內(nèi)通水降溫至37℃。8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:步驟(1)中厭氧培養(yǎng)條件為,在PH為7,溫度為37~37.5℃,攪拌轉(zhuǎn)速為100r/min。9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:步驟(1)中溶原性噬菌體發(fā)酵液經(jīng)液相色譜儀測定生物量達到120~125g/L。10.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于:步驟(2)中溶原性噬菌體發(fā)酵液泵流量為16L/min,尿液噴射泵流量為650L/min,每噸尿液加入20L溶原性噬菌體發(fā)酵液。
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專利技術(shù)附圖

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