本發明公開了一種溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，包括如下步驟：(1)用pH值6.0～10.5的緩沖溶液稀釋含有溶菌酶的混合液得到上樣液，以0.1～25cm/min的流速上晶膠床柱，進行吸附；(2)以去離子水或pH值6.0～10.5的緩沖溶液為沖洗液，沖洗掉晶膠內未被吸附的雜質；(3)用含有0.02～3M堿金屬鹽的pH值6.0～10.5的緩沖溶液為洗脫液，進行洗脫，收集含溶菌酶的洗脫峰，得到所述的溶菌酶。本發明方法的價值主要體現在：工藝過程簡單，處理量大，得到的溶菌酶純度高，且晶膠介質再生方便，可重復使用，是一種低成本的溶菌酶分離純化方法。

1.一種溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，包括如下步驟：
（1）用去離子水或pH值6.0～10.5的緩沖溶液稀釋含有溶菌酶的混合液得到上
樣液，以0.1～25cm/min的流速上晶膠床柱，進行吸附；所述的含有溶菌酶的混
合液為雞蛋清；所述晶膠床柱中的晶膠介質為陽離子交換型，其功能基團為磺
酸基；
（2）以去離子水或pH值6.0～10.5的緩沖溶液為沖洗液，沖洗掉晶膠內未被吸
附的雜質；
（3）用含有0.02～3M堿金屬鹽的pH值6.0～10.5的緩沖溶液為洗脫液，進行
洗脫，收集含溶菌酶的洗脫峰，得到所述的溶菌酶。
2.如權利要求1所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于：所述的
雞蛋清為預處理后的雞蛋清，所述的預處理是指先用0.1～1M的鹽酸溶液將雞
蛋清的pH調至6.0-7.0，離心后將其上清液的pH用0.1～1M的氫氧化鈉溶液調
至7.0～10.0范圍，再次離心后得到上清液。
3.如權利要求1或2所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于步驟
（2）中所述沖洗液的流速在0.1～25cm/min。
4.如權利要求1或2所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于步驟
（3）中的洗脫為梯度洗脫，洗脫液流速0.2～20cm/min，先用含堿金屬鹽0.02～
0.15M的pH值6.0～10.5的緩沖溶液進行洗脫，再用堿金屬鹽含量相應更高的
pH值6.0～10.5的緩沖溶液進行洗脫，收集含溶菌酶的洗脫峰，得到所述的溶
菌酶。
5.如權利要求1或2所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于所述
的堿金屬鹽為NaCl或KCl。
6.如權利要求1或2所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于所述
的緩沖溶液選自下列之一：①pH?6.0～8.0磷酸鹽緩沖溶液、②pH?7.1～9.0Tris-
鹽酸緩沖溶液、③pH?9.1～10.5碳酸鹽緩沖溶液。
7.如權利要求1或2所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于依次
用0.1M?HCl、1～2M?NaCl和去離子水對步驟（3）使用過的晶膠床柱進行再生。
8.如權利要求3所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于依次用
0.1M?HCl、1～2M?NaCl和去離子水對步驟（3）使用過的晶膠床柱進行再生。
9.如權利要求4所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于依次用
0.1M?HCl、1～2M?NaCl和去離子水對步驟（3）使用過的晶膠床柱進行再生。
10.如權利要求5所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于依次用
0.1M?HCl、1～2M?NaCl和去離子水對步驟（3）使用過的晶膠床柱進行再生。
11.如權利要求6所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于依次用
0.1M?HCl、1～2M?NaCl和去離子水對步驟（3）使用過的晶膠床柱進行再生。
12.如權利要求1所述的溶菌酶的晶膠吸附層析分離方法，其特征在于所述方
法按照如下步驟進行：
（a）以pH值6.0～10.5的緩沖溶液平衡晶膠床柱；所述晶膠床柱中的晶膠介質
為陽離子交換型，其功能基團為磺酸基；
（b）用pH值6.0～10.5的緩沖溶液稀釋雞蛋清或預處理后的雞蛋清得到上樣液，
以0.1～25cm/min的流速上晶膠床柱，進行吸附；
（c）以去離子水或pH值6.0～10.5的緩沖溶液為沖洗液，以0.1～25cm/min的
流速沖洗掉晶膠內未被吸附的雜質；
（d）用含有0.02～3M堿金屬鹽的pH值6.0～10.5的緩沖溶液為洗脫液，進行
梯度洗脫，先用含堿金屬鹽0.02～0.15M的pH值6.0～10.5的緩沖溶液進行洗
脫，再用堿金屬鹽含量相應更高的pH值6.0～10.5的緩沖溶液進行洗脫，洗脫
液流速0.2～20cm/min，收集含溶菌酶的洗脫峰，得到所述的溶菌酶；所述的堿
金屬鹽為NaCl或KCl；
（e）依次用0.1M?HCl、1～2M?NaCl和去離子水對晶膠床柱進行再生。