本發(fā)明涉及一種利用超大孔連續(xù)床晶膠層析技術(shù)(Supermacroporous Cryogel Chromatography，簡稱晶膠層析)從微生物發(fā)酵液中分離三磷酸胞苷(CTP)的方法。所述方法是，首先將微生物發(fā)酵液的pH值調(diào)為酸性，以一定流速通過陰離子交換型超大孔連續(xù)床晶膠介質(zhì)床柱，進(jìn)行吸附；然后，用沖洗液沖洗床柱，去除柱內(nèi)殘留的發(fā)酵液和雜質(zhì)，用洗脫液分步洗脫，得到純度較高的CTP。本發(fā)明提供的方法將現(xiàn)有CTP分離工藝中的菌體過濾、乙醇沉淀、陽離子交換、陰離子交換樹脂吸附等多個步驟簡化為通過晶膠吸附層析一步實現(xiàn)，工藝簡單，料液在柱內(nèi)停留時間短，分離迅速，處理流速高，分離過程成本低，得到的CTP純度高，晶膠介質(zhì)可方便地進(jìn)行再生，重復(fù)使用，規(guī)?；a(chǎn)分離十分方便。

1.一種三磷酸胞苷的晶膠吸附層析分離方法，所述方法如下：(1)將含有三磷酸胞苷的混合液調(diào)pH為酸性，以0.1～30cm/min流速上超大孔連續(xù)床晶膠介質(zhì)床柱，進(jìn)行吸附；所述晶膠介質(zhì)為陰離子交換晶膠介質(zhì)，所述陰離子交換晶膠介質(zhì)的孔徑為5～400μm、孔隙率為50～98％、功能基團(tuán)為胺基或其衍生基團(tuán)；所述胺基或其衍生基團(tuán)為下列之一：①-N⁺(CH₃)₃、②-N(CH₃)₂、③-N(C₂H₅)₂；(2)以去離子水或pH值1～6的稀酸溶液為沖洗液沖洗床柱，除去晶膠介質(zhì)內(nèi)殘留的混合液；(3)用洗脫液進(jìn)行洗脫，收集含三磷酸腺苷的洗脫峰，得到所述的三磷酸腺苷，所述的洗脫液為含有0.001～3M堿金屬鹽的稀酸溶液。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中的洗脫為梯度洗脫，洗脫液流速0.1～20cm/min，步驟如下：先用含堿金屬鹽0.001～0.06M、pH?1～6的稀酸溶液I進(jìn)行洗脫，再用含堿金屬鹽0.1～3M、pH?1～6的稀酸溶液II進(jìn)行洗脫，收集含三磷酸胞苷的洗脫峰，得到所述的三磷酸胞苷。3.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述稀酸溶液I、稀酸溶液II各自獨立為下列之一：①鹽酸溶液、②硫酸溶液、③乙酸溶液、④檸檬酸溶液。4.如權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述堿金屬鹽為NaCl或KCl。5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中含有三磷酸胞苷的混合液為酵母發(fā)酵液。6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述方法如下：(1)將含有三磷酸胞苷的酵母發(fā)酵液調(diào)pH為2～3，以2～10cm/min流速上超大孔連續(xù)床晶膠介質(zhì)床柱，進(jìn)行吸附；所述晶膠介質(zhì)為陰離子交換晶膠介質(zhì)，所述陰離子交換晶膠介質(zhì)的孔徑為5～400μm、孔隙率為50～98％、功能基團(tuán)為下列之一：①-N⁺(CH₃)₃、②-N(CH₃)₂、③-N(C₂H₅)₂；(2)用沖洗液以2～10cm/min流速沖洗床柱，除去晶膠介質(zhì)內(nèi)殘留的混合液；所述沖洗液為下列之一：①去離子水、②pH2～4的鹽酸溶液、③pH2～4的硫酸溶液、④pH2～4的乙酸溶液、⑤pH2～4的檸檬酸溶液；(3)用洗脫液以2～10cm/min流速進(jìn)行梯度洗脫：先用含NaCl或KCl0.001～0.06M、pH?1～6的稀酸溶液I進(jìn)行洗脫，再用含NaCl或KCl?0.1～3M、pH?1～6的稀酸溶液II進(jìn)行洗脫，收集含三磷酸胞苷的洗脫峰，得到所述的三磷酸胞苷；所述稀酸溶液I、稀酸溶液II各自獨立為下列之一：①鹽酸溶液、②硫酸溶液、③乙酸溶液、④檸檬酸溶液。