1.一種布氏桿菌檢測試劑盒，其特征在于，所述的布氏桿菌檢測試劑盒包
括以布氏桿菌的OMP25基因為靶基因、基于環介導恒溫擴增技術設計的兩對引
物：內引物FIP/BIP和外引物F3/B3，所述的兩對引物為
外引物F3（1）：
CCTTTGCTGGCTGGAACT
外引物B3（1）：
GCAATACCAGCCGTGAGG
內引物FIP（1）：
GTCCTTGGACTTCTTGGCCCAGttttTCCAGCAGGACCAGATCG
內引物BIP（1）：
GGCCTGGAAGTCAAGCAGGGttttACGGCATAACCGGGTTCA
或
外引物F3（2）：
CAAGACCAGCACCGTTGG
外引物B3（2）：
GGTTCAGGTCGTAGCCGA
內引物FIP（2）：
GGTCCTGCTGGAAGTTCCAGCttttAGCATCAAGCCTGACGATTG
內引物BIP（2）：
CGGTGTTGAAGGTGATGCAGGTttttTTCAAAGCCCTGCTTGACTT；
所述的布氏桿菌檢測試劑盒還包括BstDNA聚合酶、反應液、穩定液、樣品
預處理液、顯色液和陽性對照液；
所述的BstDNA聚合酶：酶濃度4-10U/μL；
所述的反應液含：1.6～2mmol/L?dNTP、20～25mmol/L?Tris-HCl、10～
12.5mmol/L?KCl、10～12.5mmol/L??（NH4）2SO4、8～10mmol/L?MgSO4、0.1～
0.125體積％TritonX-100、0.8～1mol/L甜菜堿；
所述的樣品預處理液含：10～20mmol/L?pH?8.0的Tris-HCl、1～2mmol/L
EDTA和1～1.2體積%Triton?X-100；
所述的顯色液為SYBR?Green?I或Eva?Green；
所述穩定液為石蠟油；
所述的陽性對照液為布氏桿菌基因組DNA；
所述的內引物FIP/BIP各為1.2～2.0μmol/L，外引物F3/B3的濃度各為0.2～
0.25μmol/L。
2.根據權利要求1所述的布氏桿菌檢測試劑盒，其特征在于，
所述的BstDNA聚合酶：酶濃度8U/μL；
所述的反應液含：2mmol/L?dNTP、25mmol/L?Tris-HCl、12.5mmol/L?KCl、
12.5mmol/L（NH4）2SO4、10mmol/L?MgSO4、0.125體積％TritonX-100、1mol/L
甜菜堿；
所述的樣品預處理液含：20mmol/L?pH?8.0的Tris-HCl、2mmol/L?EDTA
和1.2體積%Triton?X-100；
所述的顯色液為SYBR?Green?I；
所述的內引物FIP/BIP的濃度為1.6μmol/L；
所述的外引物F3/B3的濃度為0.2μmol/L。
3.根據權利要求2所述的布氏桿菌檢測試劑盒，其特征在于，所述的布氏
桿菌檢測試劑盒還包括反應管，所述的反應管由管體和管蓋兩部分組成，管體
內腔的下部設有將其分隔成A、B兩個空腔的縱向延伸的隔板。
4.根據權利要求3所述的布氏桿菌檢測試劑盒，其特征在于，所述的A、
B兩個空腔中分別裝有工作液或顯色液，兩個空腔中的液體上層均由穩定液封
存，所述工作液為反應液和BstDNA聚合酶混合而成。
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