本發(fā)明提供一種分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒，所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒包括以分枝桿菌屬的hsp65基因?yàn)榘谢颉⒒诃h(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物：內(nèi)引物FIP/BIP和外引物F3/B3。本發(fā)明的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒檢測(cè)效果更全面、漏檢率低。

1.一種分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑
盒包括以分枝桿菌屬的hsp65基因?yàn)榘谢颉⒒诃h(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)設(shè)計(jì)的兩
對(duì)引物：內(nèi)引物FIP/BIP和外引物F3/B3，所述的兩對(duì)引物為
外引物F3：
TCATCACCGTCGAGGAGTC
外引物B3：
CGGCTCCGATGACCTTCTC
內(nèi)引物FIP：
GTCGGTCACGAAGTACCCCGAGCTGCAGCTCGAGCTCACC
內(nèi)引物BIP：
AGCGTCAGGAGGCVGTCCTTGACAGTGGACACCTTGGAG；
其中，V代表A/C/G。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的分
枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒還包括BstDNA聚合酶、反應(yīng)液、穩(wěn)定液、樣品預(yù)處理液、
顯色液和陽(yáng)性對(duì)照液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒，其特征在于，
所述的BstDNA聚合酶：酶濃度4-10U/μL；
所述的反應(yīng)液含：1.6～2mmol/LdNTP、20～25mmol/LTris-HCl、10～
12.5mmol/LKCl、10～12.5mmol/L（NH₄）₂SO₄、8～10mmol/LMgSO₄、0.1～0.125
體積％TritonX-100、0.8～1mol/L甜菜堿；
所述的樣品預(yù)處理液含：10～20mmol/LpH8.0的Tris-HCl、1～2mmol/L
EDTA和1～1.2體積%TritonX-100；
所述的顯色液為SYBRGreenI或EvaGreen；
所述穩(wěn)定液為石蠟油；
所述的陽(yáng)性對(duì)照為BCG基因組DNA；
所述的內(nèi)引物FIP/BIP各為0.2～0.25μmol/L，外引物F3/B3的濃度各為1.2～
2.0μmol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒，其特征在于，
所述的BstDNA聚合酶：酶濃度8U/μL；
所述的反應(yīng)液含：2mmol/LdNTP、25mmol/LTris-HCl、12.5mmol/LKCl、
12.5mmol/L（NH₄）₂SO₄、10mmol/LMgSO₄、0.125體積％TritonX-100、1mol/L
甜菜堿；
所述的樣品預(yù)處理液含：20mmol/LpH8.0的Tris-HCl、2mmol/LEDTA和1.2
體積%TritonX-100；
所述的顯色液為SYBRGreenI；
所述的內(nèi)引物FIP/BIP的濃度各為0.2μmol/L；
所述的外引物F3/B3的濃度各為1.6μmol/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求2、3或4所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒，其特征在于，
所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒還包括反應(yīng)管，所述的反應(yīng)管由管體和管蓋兩部
分組成，管體內(nèi)腔的下部設(shè)有將其分隔成A、B兩個(gè)空腔的縱向延伸的隔板。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分枝桿菌屬檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述的A、B
兩個(gè)空腔中分別裝有工作液或顯色液，兩個(gè)空腔中的液體上層均由穩(wěn)定液封存，
所述工作液為反應(yīng)液和BstDNA聚合酶的混合而成。