1.檢測HER-2基因擴增的熒光原位雜交雙色探針，其特征在于包括LSP HER-2/CSP17探
針，其中，所述HER-2/CSP17探針采用隨機引物法分別標記HER-2 DNA和CSP17 DNA模板序列
而得，為熒光原位雜交雙色探針，
所述的探針標記時采用的HER-2 DNA為克隆號RP11-2456M7的BAC克隆，
所述的探針標記時采用的CSP17 DNA為17號染色體著絲粒特異的α-衛星DNA，其序列
為：
gggaaatatc ttcaaataaa aaccagacag aatcattctc agaaaattct ttgtgatgtg
tgcgttcaac tcacatagtt taacctttct tttcatagag cagtttggaa acactctgtt tgtaaagtct
gcaagtggat atatggaccg cattgaggcc ttcgttggaa acgggatttc ttcatttcat gctagacaga
agaattctca gtaacttctt tgtgctgtgt gtattcaact cacagagtgg aacgtccctt tgcacagagc
agatttgaaa cactcttttt gtggaatttg caagtggaga tttcaagcga tttgatgcca acagtagaaa。
2.如權利要求1所述的檢測HER-2基因擴增的熒光原位雜交雙色探針，其特征在于：
HER-2和CSP17探針之間的質量比為1：1。
3.一種試劑盒，其特征在于，包括權利要求1中所述的檢測HER-2基因擴增的熒光原位
雜交雙色探針，和DAPI復染液，這2種組份分別裝于不同管內。
4.對HER-2基因進行檢測的方法，采用如權利要求1至2任一項所述的探針，用于非疾病
診斷和治療目的，包括如下步驟：
1）對FFPE樣本進行預處理，
2）在避光條件下，將探針與玻片上的待測組織進行變性、雜交，
3）在避光條件下，對玻片進行洗滌，
4）在避光條件下，使用復染液對玻片上的雜交區域進行復染，
5）在避光條件下，使用熒光顯微鏡觀察玻片的雜交區域，進行結果判讀。
5.如權利要求4所述的對HER-2基因進行檢測的方法，其特征在于：步驟1）包括如下步
驟：
（1）烤片（2）二甲苯脫蠟（3）梯度乙醇水化（4）預處理液處理（5）蛋白酶K消化（6）梯度乙
醇逐步脫水。
6.如權利要求4所述的對HER-2基因進行檢測的方法，其特征在于：步驟2）包括以下步
驟：
（1）打開雜交儀，設定或選擇已保存的程序：85℃變性5 min，37℃雜交過夜；
（2）將雜交儀的濕條用水浸濕，放入雜交儀中，使雜交在一定的濕度條件下進行；
（3）取10 μL探針加在樣本中心區域，小心蓋上蓋玻片，避免產生氣泡，然后用封片膠
（RUBBER CEMENT）封住蓋玻片；
（4）將玻片輕放于雜交儀中，啟動雜交程序。
7.如權利要求4所述的對HER-2基因進行檢測的方法，其特征在于：步驟3）包括以下步
驟：
（1）雜交結束后，從雜交儀中取出玻片，用鑷子去掉封片膠；
（2）室溫下，將玻片浸入2×SSC溶液中，浸泡5 min，脫去蓋玻片；
（3）慢洗方案步驟：將玻片浸入預熱至46℃的慢洗洗滌液中，洗滌7 min；快洗方案步
驟：將玻片浸入預熱至72℃的快洗洗滌液中，洗滌2 min；
（4）逐步脫水：將玻片依次浸入70%乙醇1 min、85%乙醇1 min、無水乙醇3 min，取出平
放于超凈工作臺或通風櫥中晾干。
8.如權利要求4所述的對HER-2基因進行檢測的方法，其特征在于：步驟4）包括以下步
驟：
（1）取10μL DAPI復染液加在樣本中心區域，小心蓋上蓋玻片并壓緊，避免產生氣泡；
（2）室溫下，靜置15 min。
9.如權利要求4所述的對HER-2基因進行檢測的方法，其特征在于：步驟5）包括以下步
驟：
（1）在油鏡下，對紅、綠熒光信號進行計數，
計數30個細胞，分別計算Ratio值和每個細胞平均的HER-2信號數；
（2）根據結果判讀依據得出結論。
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