本發明公開了一種細胞系法檢測熱原的方法和試劑盒。所述的方法包括以下的步驟：(1)制備熱原物質的標準溶液和待檢樣品的溶液；(2)將步驟(1)所述的熱原物質的標準溶液或待檢樣品的溶液分別加入含有HL?60細胞的細胞培養液中培養，取培養后細胞的上清液；(3)檢測步驟(2)所述細胞的上清液中細胞因子IL?6的含量。所述的方法能夠模擬人體對熱原的反應，并對革蘭氏陰性菌來源、革蘭氏陽性菌來源和酵母來源的熱原物質進行定性和定量分析，靈敏度高，簡單易行。所述的試劑盒包括熱原物質的標準溶液、細胞因子IL?6的檢測試劑和HL?60細胞；所述試劑盒操作簡便，能夠對熱原物質進行定性和定量分析，靈敏度高。

1.一種細胞系法檢測熱原的方法，其特征在于，其包括以下的步驟：
（1）制備熱原物質的標準溶液和待檢樣品的溶液；
（2）將步驟（1）所述的熱原物質的標準溶液或待檢樣品的溶液分別加入含有HL-60細胞
的細胞培養液中培養，取培養后細胞的上清液；所述的培養時間為1~3天；所述的細胞培養
液為含0.5~20%胎牛血清的IMDM培養液；所述的HL-60細胞的細胞密度為5×10⁶個/mL~5×
10⁷個/mL；所述的HL-60細胞是經過傳代培養的HL-60細胞，所述的傳代培養的代數為所述
HL-60細胞復蘇后5~20代，所述的傳代培養包括以下的步驟：將HL-60細胞用含10~25%胎牛
血清的IMDM培養液培養，每2~3天更換所述的細胞培養液一次，即可；所述熱原物質的標準
溶液或所述待檢樣品的溶液與所述細胞培養液的體積比為1:1~1:4；所述的百分比為胎牛
血清占IMDM培養液的體積百分比；
（3）檢測步驟（2）所述細胞的上清液中細胞因子IL-6的含量。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中所述的熱原物質為革蘭氏陰性菌
來源的熱原物質、革蘭氏陽性菌來源的熱原物質和酵母來源的熱原物質中的一種或多種；
所述的待檢樣品為注射液；
所述的熱原物質的標準溶液的制備方法為用稀釋液稀釋所述熱原物質；所述的待檢樣
品的溶液為所述待檢樣品本身或將所述待檢樣品用稀釋液稀釋；
和/或，所述的稀釋液為含0.5~20%胎牛血清的IMDM培養液，所述的百分比為胎牛血清
占IMDM培養液的體積百分比。
3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，所述的待檢樣品為靜脈注射液或肌肉注射
液；
所述的熱原物質為細菌內毒素、脂壁酸和酵母多糖中的一種或多種；
和/或，所述的稀釋液為含1~10%胎牛血清的IMDM培養液，所述的百分比為胎牛血清占
IMDM培養液的體積百分比。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，所述的稀釋液為含2~5%胎牛血清的IMDM培養
液，所述的百分比為胎牛血清占IMDM培養液的體積百分比。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的傳代培養中，將HL-60細胞在含15~20%
胎牛血清的IMDM培養液培養，所述的百分比為胎牛血清占IMDM培養液的體積百分比。
6.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述的培養的時間為1~2天；所述
的細胞培養液為含1~10%胎牛血清的IMDM培養液；步驟（3）中，所述的檢測的方法為ELISA
法；和/或，所述的方法還包括如下的步驟：（4）根據步驟（3）檢測的細胞因子IL-6的含量，得
到熱原檢測的結果。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述的細胞培養液為含2~5%胎牛血清的IMDM
培養液，所述的百分比為胎牛血清占IMDM培養液的體積百分比。