1.一種檢測(cè)磺胺類化合物的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒,包括磺胺類化合物特異性抗
體、包被原和標(biāo)準(zhǔn)品溶液;所述包被原為磺胺類化合物半抗原與載體蛋白的偶聯(lián)物;
其結(jié)構(gòu)式如式Ⅰ所示:
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所述磺胺類化合物特異性抗體是由保藏號(hào)為CGMCC?No.3780的對(duì)磺胺二甲嘧
啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、
磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪和磺胺對(duì)甲氧嘧啶都有交叉反應(yīng)的磺胺甲基異惡唑單克隆雜
交瘤細(xì)胞株SAs分泌的抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述試劑盒還包
括濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液、包被緩沖液、封閉液和量子點(diǎn)標(biāo)記的抗抗體;
所述試劑盒由磺胺類化合物特異性抗體、包被原、標(biāo)準(zhǔn)品溶液、濃縮洗滌液、濃
縮復(fù)溶液、包被緩沖液、封閉液和量子點(diǎn)標(biāo)記抗抗體組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述量子
點(diǎn)標(biāo)記的抗抗體中所述量子點(diǎn)為QD650。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述標(biāo)準(zhǔn)品
溶液中標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為0μg/L、0.5μg/L、1.5μg/L、4.5μg/L、22.5μg/L或112.5μg/L,
所述標(biāo)準(zhǔn)品為磺胺甲惡唑;
所述濃縮洗滌液是將0.05g疊氮化鈉和100mL濃度為0.02M、pH為7.4的磷酸鹽
緩沖液混合得到溶液;
所述濃縮復(fù)溶液是將0.1g牛血清白蛋白和100mL濃度為0.05mol/L、pH為7.4的
磷酸鹽緩沖液混合得到的溶液;
所述包被緩沖液是pH值為9.6的濃度為0.03mol/L的碳酸鹽緩沖液;
所述封閉液是將0.01g疊氮化鈉、10g牛血清白蛋白和100mL濃度為0.03mol/L、
pH值為7.4磷酸鹽溶液混合得到的溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒,其特征在于:
所述包被原是按照如下方法制備得到的:a、將每52mg磺胺類化合物半抗原加
入6mL0.25M的硫酸水溶液中,得到的溶液稱為A液;將每80mg的載體蛋白溶于
4mL濃度為100mg/mL、pH值為10的碳酸鈉水溶液中,得到的溶液稱為B液;將每
20mg亞硝酸鈉溶于2mL水得到的溶液稱為C液;在0℃條件下,將C液加入到A
液中得到的混合物稱為D液;
b、將D液逐滴加入到B液中,得到D液和B液的混合液;逐滴加入的方式為從
開始加入時(shí)計(jì)起,6min后開始攪拌混合液,并使混合液的pH保持在9-10之間,滴加
完畢后,繼續(xù)攪拌反應(yīng)4h,將得到的產(chǎn)物透析,得到所述包被原;
所述磺胺類化合物半抗原的結(jié)構(gòu)式如式Ⅱ所示:
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6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒,其特征在于:所述磺胺類
化合物半抗原為磺胺甲惡唑。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒,其特征在于:
所述量子點(diǎn)標(biāo)記抗抗體為量子點(diǎn)QD650標(biāo)記的羊抗鼠抗抗體;
所述載體蛋白為鼠血清白蛋白、牛血清白蛋白、卵清蛋白或血藍(lán)蛋白;
所述磺胺類化合物為磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧
啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪或磺胺對(duì)甲氧嘧啶。
8.一種檢測(cè)磺胺類化合物的方法,包括以下步驟:
1)樣品前處理:
將每1g動(dòng)物組織勻漿后,加入4mL的乙腈-鹽酸混合液振蕩混合1min,以3000g
的速度離心5min,將2mL上清液用氮?dú)獯蹈桑尤?mL復(fù)溶液溶解干燥的殘留物,
再加入1mL正己烷混合,3000g離心5min,取下層溶液用復(fù)溶液稀釋2倍后獲得待測(cè)
樣本溶液,所述乙腈-鹽酸混合液是由體積比為84:16的乙腈和濃度為0.1M鹽酸水溶
液混合得到;所述動(dòng)物組織為豬肉或雞肉;所述復(fù)溶液為將所述濃縮復(fù)溶液用
0.05mol/L、pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液稀釋10倍得到的;
2)利用權(quán)利要求1-7中任一所述的檢測(cè)磺胺類化合物的量子點(diǎn)熒光免疫試劑盒
檢測(cè)步驟1)中的樣本溶液;
所述磺胺類化合物為磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧
啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪或磺胺對(duì)甲氧嘧啶。
9.一種磺胺類化合物特異性抗體,其是由保藏號(hào)為CGMCC?No.3780的對(duì)磺胺
二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹
噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧噠嗪和磺胺對(duì)甲氧嘧啶都有交叉反應(yīng)的磺胺甲基異惡唑單
克隆雜交瘤細(xì)胞株SAs分泌的抗體。
10.一種雜交瘤細(xì)胞株,其是保藏號(hào)為CGMCC?No.3780的對(duì)磺胺二甲嘧啶、磺
胺甲惡唑、磺胺甲嘧啶、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧
啶、磺胺甲氧噠嗪和磺胺對(duì)甲氧嘧啶都有交叉反應(yīng)的磺胺甲基異惡唑單克隆雜交瘤細(xì)
胞株SAs。