本發(fā)明公開了一種板栗疫病菌分子檢測試劑盒及其使用方法。本發(fā)明的試劑盒包括10μmol/L的引物CP1/CP2各1μL；10μmol/L的引物SC1/SC2各1μL、ddHO7.5μL、Premix12.5μL；其中，CP1序列為5＇－CGGCCCACTAAACTCTTTGT－3＇，CP2序列為5＇－ATTTCAGGGCCTACCGTTTT－3＇SC1序列為5＇－AACGGTGACCCTTCTGGGGC－3＇，SC2序列為5＇－AACGGTGACCGCAAAGGACTC－3＇。本發(fā)明克服RAPD穩(wěn)定性差、重復(fù)性差等缺點，同時提高了病害檢測的準確性；本發(fā)明可快速準確的對板栗疫病菌進行分子鑒定和板栗疫病的早期診斷，對控制板栗疫病的檢疫及病害的防治具有重要意義。

1.一種板栗疫病菌分子檢測試劑盒，其特征在于，其包括10μmol/L的引物
CP1/CP2各1μL；10μmol/L的引物SC1/SC2各1μL、ddH₂O7.5μL、Premix12.5μL；
其中，CP1序列為5＇－CGGCCCACTAAACTCTTTGT－3＇，CP2序列為5＇－
ATTTCAGGGCCTACCGTTTT－3＇SC1序列為5＇－AACGGTGACCCTTCTGGGGC－
3＇，SC2序列為5＇－AACGGTGACCGCAAAGGACTC－3＇。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的板栗疫病菌分子檢測試劑盒的使用方法，其特征是，
其步驟如下：
(1)提取純培養(yǎng)菌株基因組DNA或所取植物組織樣總DNA；
(2)所述的反應(yīng)體系包含：10μmol/L的引物CP1/CP2各1μL，10μmol/L的引物
SC1/SC2各1μL；12.5μLPremix，ddH₂O7.5μL；加(1)中提取的DNA提取液1μL，
組成反應(yīng)混合液；
(3)PCR反應(yīng)條件為：94℃預(yù)變性4min；94℃變性40sec，62℃退火30sec，72
℃延伸30sec，共35個循環(huán)；72℃延伸7min；
(4)PCR產(chǎn)物的電泳檢測：取(3)中PCR擴增產(chǎn)物5μL，在質(zhì)量濃度1.5％～2％
的瓊脂糖凝膠上進行電泳，電泳緩沖液為1×TAE，100V電壓下電泳20min后，經(jīng)溴
化乙錠染色后在紫外燈下檢測結(jié)果；如果存在分子量為285bp和389bp的雙片段，則判
定所述菌株中或植株組織樣中存在板栗疫病菌。