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一種用于乳酸菌耐藥性測定的通用培養基及其應用

  • 專利類型:發明專利
  • 有效期:不限
  • 發布日期:2021-09-08
  • 技術成熟度:已有樣品
交易價格: ¥面議
  • 法律狀態核實
  • 簽署交易協議
  • 代辦官方過戶
  • 交易成功

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  • 技術(專利)類型 發明專利
  • 申請號/專利號 CN201510303417.X 
  • 技術(專利)名稱 一種用于乳酸菌耐藥性測定的通用培養基及其應用 
  • 項目單位 中國檢驗檢疫科學研究院
  • 發明人 趙貴明,陳穎,趙勇勝,姬慶龍,王娉,楊海榮 
  • 行業類別 健康產品質檢-質量檢驗
  • 技術成熟度 已有樣品
  • 交易價格 ¥面議
  • 聯系人 錢乙惠
  • 發布時間 2021-09-08  
  • 01

    項目簡介

    本發明公開了一種用于乳酸菌耐藥性測定的通用培養基,其中每1000mL的培養基包括:蛋白胨7~15g,牛肉浸粉3~7g,酵母粉2~4g,葡萄糖15~25g,抗壞血酸棕櫚酸酯0.8~1.2g,維生素B6為2.6mg,半胱氨酸鹽酸鹽0.5~1g,泊洛沙姆1.0~2.0g,硫酸鎂0.1~0.3g,MnSO.4HO 0.05g,β?甘油磷酸二鈉15~25g,瓊脂15~20g,余量為水,pH為6.2±0.2。本發明的培養基可用于乳酸菌中三種不同類型菌種同時生長,培養基的成分對各類試驗抗生素不會產生影響,大大降低了檢測成本,并且減少操作步驟,降低工作人員的勞動強度。
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  • 02

    說明書

    1.一種用于乳酸菌耐藥性測定的通用培養基,其特征在于,每1000mL的培養基包括:蛋
    白胨7~15g,牛肉浸粉3~7g,酵母粉2~4g,葡萄糖15~25g,抗壞血酸棕櫚酸酯0.8~1.2g,
    維生素B6為2.6mg,半胱氨酸鹽酸鹽0.5~1g,泊洛沙姆1.0~2.0g,硫酸鎂0.1~0.3g,
    MnSO4.4H2O 0.05g,β-甘油磷酸二鈉15~25g,瓊脂15~20g,余量為水,pH為6.2±0.2。
    2.如權利要求1所述的通用培養基,其特征在于,所述蛋白胨為胰酪胨、大豆胨、細菌蛋
    白胨或胰酪胨和大豆胨的混合物。
    3.如權利要求1所述的通用培養基,其特征在于,所述維生素B6為吡哆醇、鹽酸吡哆醛
    或吡哆胺。
    4.如權利要求1所述的通用培養基,其特征在于,所述泊洛沙姆為泊洛沙姆188。
    5.如權利要求1所述的通用培養基,其特征在于,所述蛋白胨為胰酪胨5g和大豆胨5g;
    所述牛肉浸粉為5g,所述酵母粉為3g,所述葡萄糖為20g,所述抗壞血酸棕櫚酸酯為1g,所述
    維生素B6為鹽酸吡哆醛,所述半胱氨酸鹽酸鹽為0.5g,所述泊洛沙姆為1.2g,所述硫酸鎂為
    0.2g,所述β-甘油磷酸二鈉為15~19g,所述瓊脂為13g。
    6.一種用于測定乳酸菌對抗生素耐藥性實驗的方法,其特征在于,包括如下步驟:
    1)平板制備:稱取如權利要求1-5中任一項通用培養基的各組分,加入到去離子水中,
    攪拌,加熱至完全溶解,調節pH至6.2±0.2,高壓滅菌后,待冷卻至45℃~55℃,無菌操作倒
    平板,備用;
    2)受試菌和標準對照菌的活化與培養:受試菌與標準對照菌分別在各自最適溫度下活
    化2~3代,分別以0.5~1.5%接種量接種液體培養基,在最適溫度下厭氧或好氧培養12h左
    右,采用標準比濁溶液測定菌液的OD值,使菌液濃度在1.5×108~3.0×108cfu/mL范圍;
    3)接種:分別吸取受試菌與標準對照菌0.1mL,接種于所述步驟1制備的培養基上,涂布
    均勻,放置7~15min,使培養基表面干燥;
    4)藥敏紙片貼放及培養:將標準藥敏紙片貼放所述步驟1制備的固體培養基表面,每皿
    4片,紙片外沿距平皿外沿15~20mm,紙片間距20mm,然后將平皿倒置在培養箱或充N2的厭
    氧罐中,于最適溫度下培養18~20h,對生長緩慢者培養48h;
    5)結果分析:測量抑菌圈寬度并判斷受試菌對抗生素的敏感性測量受試菌與標準對照
    菌的抑菌圈寬度,判斷受試菌抗生素的敏感性結果。
    7.如權利要求6所述的方法,其特征在于,所述受試菌包括乳桿菌、雙歧桿菌和/或嗜熱
    鏈球菌。
    8.如權利要求6所述的方法,其特征在于,所述標準對照菌為金黃色葡萄球菌。
    9.如權利要求6所述的方法,其特征在于,所述最適合溫度為36℃±1℃。
    10.如權利要求6所述的方法,其特征在于,所述判斷的標準為:當受試菌的抑菌圈寬度
    大于或等于標準對照菌的抑菌圈寬度,或者前者小于后者,但兩者之差小于3mm判為敏感;
    當受試菌的抑菌圈寬度大于3mm,但小于標準對照的抑菌圈寬度,且二者之差大于3mm為中
    度敏感;當抑菌圈的寬度小于或等于3mm,為耐藥。
    展開

專利技術附圖

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