本發(fā)明同時鑒別Q型和B型煙粉虱的特異性PCR方法及試劑盒，屬于分子生物學(xué)檢測技術(shù)，包括對待測煙粉虱的DNA進行PCR擴增和檢測PCR擴增產(chǎn)物，其特征在于：所述PCR擴增所采用的引物對如下：上游引物Bt-F：5’-TCT CAT CGG TGT CTTATT G-3’，下游引物Bt-R：5’-CTT CGG GTC GTT TCT CGT-3’；所述檢測PCR擴增產(chǎn)物指對PCR擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳并觀察是否出現(xiàn)特征帶型，Q型煙粉虱的特征帶型為一條507bp條帶；B型煙粉虱特征帶型為507bp和660bp兩條帶，本發(fā)明還基于該方法提供了試劑盒。

1.用于檢測B型煙粉虱和Q型煙粉虱的方法，包括對待測煙粉虱的DNA進行PCR擴增和檢測PCR擴增產(chǎn)物，其特征在于： 所述PCR擴增所采用的引物對如下： 上游引物Bt-F：5’-TCT CAT CGG TGT CTT ATT G-3’， 下游引物Bt-R：5’-CTT CGG GTC GTT TCT CGT-3’； 所述檢測PCR擴增產(chǎn)物指對PCR擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳并觀察是否出現(xiàn)特征帶型，Q型煙粉虱的特征帶型為一條507bp條帶；B型煙粉虱特征帶型為507bp和660bp兩條帶； 所述PCR擴增的體系中，待測煙粉虱的DNA濃度為0.17×10^-4～0.2ng/ul。 2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，所述PCR擴增的體系還包括：Taq DNA聚合酶0.05U/μl、1×Taq緩沖液、氯化鎂1.5mM、dNTPs200μM、濃度分別為0.5μM的上游引物和下游引物、加ddH₂O至20μl。 3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，所述PCR擴增的程序為：94℃預(yù)變性3分鐘；然后進行30個循環(huán)：94℃變性1分鐘、59℃退火45秒、72℃延伸110秒；最后72℃延伸10min。 4.用于檢測B型煙粉虱和Q型煙粉虱的試劑盒，其特征在于包括一對PCR引物： 上游引物Bt-F：5’-TCT CAT CGG TGT CTT ATT G-3’， 下游引物Bt-R：5’-CTT CGG GTC GTT TCT CGT-3’。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，還包括用于PCR檢測的試劑：Taq DNA聚合酶，dNTPs，氯化鎂，Taq DNA聚合酶緩沖液和無菌水。 6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒，所述PCR引物預(yù)混于PCR預(yù)混體系中，所述PCR預(yù)混體系如下：Taq DNA聚合酶0.05U/μl、1×Taq緩沖液、1.5mM氯化鎂、200μM dNTPs、上游引物和下游引物分別0.5μM和無菌水。