本發明涉及一種同時檢測三種曲霉的引物探針組合和熒光定量PCR試劑盒，屬于病原微生物體外分子檢測技術領域。本發明提供了一種基于熒光PCR法同時檢測三種曲霉的引物探針組合，所述曲霉包括煙曲霉、黃曲霉和黑曲霉，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示，所述探針為在SEQ ID NO.3所示序列的5’端修飾有熒光基團、3’端修飾有熒光猝滅基團的物質。本發明提供的引物探針組合能夠實現煙曲霉、黃曲霉和黑曲霉的同時檢測，檢測特異型強，靈敏度高。

1.一種基于熒光PCR法同時檢測三種曲霉的引物探針組合，所述曲霉包括煙曲霉、黃曲霉和黑曲霉，其特征在于，所述引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述下游引物的序列如SEQ ID NO.2所示，所述探針為在SEQ ID NO.3所示序列的5’端修飾有熒光基團、3’端修飾有熒光猝滅基團的物質。2.根據權利要求1所述的引物探針組合，其特征在于，所述熒光基團包括FAM、SYBRGreenI、JOE、VIC、NED、CY-3、TEXASRed或CY-5。3.根據權利要求1所述的引物探針組合，其特征在于，所述熒光猝滅基團包括TAMRA或BHQ1。4.一種同時檢測三種曲霉的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：權利要求1～3任意一項所述引物探針組合、陰性對照、陽性對照和PCR反應液。5.根據權利要求4所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液包括：dATP、dCTP、dGTP、dUTP、TaqDNA聚合酶、尿嘧啶-N-糖基化酶、參比熒光、MgCl₂和緩沖液。6.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述陰性對照為含無關基因的質粒，所述無關基因的序列如SEQ ID NO.4所示。7.根據權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照包括含煙曲霉陽性對照DNA片段的質粒、含黃曲霉陽性對照DNA片段的質粒和含黑曲霉陽性對照DNA片段的質粒，所述煙曲霉陽性對照DNA片段、黃曲霉陽性對照DNA片段和黑曲霉陽性對照DNA片段的核苷酸序列分別如SEQ ID NO.5～7所示。